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更新時間:2017-07-18 12:56:20瀏覽次數(shù):184次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片規(guī)格及成分:
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片詳細(xì)說明書:
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。
HPX重組小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,小鼠)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
接觸蛋白1(CNTN1)重組蛋白 Recombinant Contactin 1 (CNTN1)
ACVR1重組人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
NPDC1重組人 NPDC-1 / NPDC1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
MANF Protein Human 重組人 MANF / ARMET 蛋白 (His 標(biāo)簽)
beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,小鼠)
ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
HPX重組小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)免疫試劑盒 Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA Kit
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性測試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
RatlymphocytefactorELISA試劑盒大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSAELISA試劑盒人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit人鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat intact parathormone (i-PTH) ELISA Kit 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒
Humanproteintyrosinekinase,PTKELISAKit 人蛋白*激酶(PTK/CD115)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBromodeoxyuridine,BrdUELISA試劑盒人溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒20次
HumanSomatostatin,SSELISAKit人*(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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