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Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10使用說明書

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更新時間:2017-07-18 12:55:29瀏覽次數(shù):198次

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Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10使用說明書是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。

Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10使用說明書產(chǎn)品及特點:
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點和 lac Zα-互補因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10使用說明書詳細(xì)說明書:

Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10使用說明書規(guī)格及成分:

Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10使用說明書使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長情況決定去留。
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)

CD97重組人 CD97 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白

ACVR2B Protein Human 重組人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

特異性蛋白1(Sp1)重組蛋白 Recombinant Specificity Protein 1 (Sp1)

LTA4H重組人 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ROM1重組人 ROM1 / Rod outer segment membrane protein 1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

TRIB2 Protein Human 重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)

ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACVR2B Protein Human 重組人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CD97重組人 CD97 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠酰tRNA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)ELISA試劑盒 ,英文名: AIMP1 ELISA Kit

人胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)ELISA檢測試劑盒Humanthymusexpressedchemokine,TECKELISAKit 96T/48T

大鼠角化細(xì)胞生長因子(KGF)免疫試劑盒 Rat Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA Kit

英文名稱RatSubstancePELISAKit大鼠P物質(zhì)(SP)規(guī)格:96T/48T

咖啡糖精(saccharin)含量紫外光譜法定量檢測試劑盒20

ELISAKitHyp人羥*規(guī)格:48T/96T
小鼠苯丙酸(LPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human general transcription complex (GTC) ELISA Kit 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)ELISA試劑盒

HumanCyclin-dependentkinase4,CDK-4ELISAKit 人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanbreastcancersusceptibilityprotein1,BRCA-1ELISA試劑盒人癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物組織細(xì)胞核高純分離試劑盒10

HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10使用說明書人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人血清白蛋白(HSA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人血凝素(HA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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