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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10*詳細(xì)說明書:
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10*產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10*規(guī)格及成分:
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。
CTLA4重組小鼠 CTLA4 / CD152 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Beta-Amyloid(1-16 0.5mgBeta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽1-16(多肽蛋白)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽) Protein
ITGA5 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
ADAM17 Protein Rat 重組大鼠 ADAM17 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
糖原磷酸化酶M(PYGM)重組蛋白 Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)
LEP重組人 Leptin 蛋白 Protein
AOC1重組人 AOC1 / Diamine oxidase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL18R1 Protein Human 重組人 IL18R1 / CD218a 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
Beta-Amyloid(1-16 0.5mgBeta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽1-16(多肽蛋白)
ITGA5 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
CTLA4重組小鼠 CTLA4 / CD152 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ADAM17 Protein Rat 重組大鼠 ADAM17 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽) Protein
大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)免疫試劑盒 Human TECK ELISA Kit
蘋果酸脫氫酶(MDH)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratluteotropichormone,LHELISA試劑盒大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowth-regulatedoncogeneβ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROβ/MGSAELISA試劑盒人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeptin,LEPELISAKit人瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠交聯(lián)物(PY)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human ferritin (FE) ELISA Kit 人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒
Humanreceptortyrosinekinase,RTKsELISAKit 人受體*激酶(RTKs)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBreastandkidneyexpressedchemokine,BRAKELISA試劑盒人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織細(xì)胞核粗提分離試劑盒20次
Humansphingomyelin,SMELISAKit人鞘磷脂(SM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10*人血栓海綿蛋白(TSP)ELISA試劑盒 96T/48 試劑盒 組裝/原裝
人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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