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XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片

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更新時間:2017-07-18 12:53:01瀏覽次數(shù):139次

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XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。

XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片規(guī)格及成分:

XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3
7. 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長情況決定去留。
CHEK1重組小鼠 CHK1 / CHEK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)重組蛋白 Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Gamma (CAMK2g)

BCL2L12重組人 BCL2L12 / BCL2-like 12 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

IRAK4 Protein Human 重組人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CXCL12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡH1(GTF2H1)重組蛋白 Recombinant General Transcription Factor IIH, Polypeptide 1 (GTF2H1)

CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

NAPA重組人 NAPA / alpha-SNAP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 (His 標(biāo)簽)
T-細(xì)胞可誘導(dǎo)共刺激分子(ICOS)重組蛋白 Recombinant Inducible T-Cell Co Stimulator (ICOS)

IRAK4 Protein Human 重組人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LIF重組小鼠 LIF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GABARAPL1重組人 ATG8 / GABARAPL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 ,英文名: NSE ELISA Kit

人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA檢測試劑盒Humanthymidinephosphorylase,TPELISAKit 96T/48T

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石蠟切片組織鈣ATPSERCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

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HumanSS-B/LaAntibody,ELISAKit人抗SS-B/La抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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