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更新時(shí)間:2017-07-18 12:50:56瀏覽次數(shù):100次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)JM109 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片規(guī)格及成分:
JM109 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
JM109 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原
BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP2)重組蛋白 Recombinant Thioredoxin Binding Protein 2 (TBP2)
CNTN1重組人 Contactin 1 / CNTN1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CA4重組人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
SOD1 Protein Human 重組人 SOD1 / Superoxide Dismutase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原
INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白
BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGFsR-α ELISA Kit
人*α1(Thymosinα1)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanThymosinα1ELISAKit 96T/48T
大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒 Rat SHC-transforming protein 1,SHC1 ELISA kit
CLIAKitforsPLA2(RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2)ELISAKit大鼠分泌型磷脂酶A2規(guī)格:48T/96T
肉類氟元素比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitMDC/CCL22人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子規(guī)格:48T/96T
小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat Pro atrial natriuretic peptide (Pro-ANP) ELISA Kit 大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒
HumanPyruvateKinase,M2-PKELISAKit 人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBonemorphogeneticproteinreceptor1A,BMPR-1AELISA試劑盒人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量檢測(cè)試劑盒(包括萃取)20次
HumanStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
JM109 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10圖片人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*(trypsin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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