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接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol*

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更新時(shí)間:2017-07-18 12:43:37瀏覽次數(shù):109次

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接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol*是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。

接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol*規(guī)格及成分:

接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol*產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol*詳細(xì)說明書:

接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3
7. 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長情況決定去留。
DDC重組小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

α1-酸性糖蛋白(α1AGP)重組蛋白 Recombinant Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP)

PPIL1重組人 PPIL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ENPP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ENPP3 / CD203c 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

纖維蛋白原α(FGα)重組蛋白 Recombinant Fibrinogen Alpha (FGa)

SLITRK1重組人 SLITRK1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

DEFA3重組人 DEFA3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

YWHAB Protein Human 重組人 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)*蛋白酶2(MASP2)重組蛋白 Recombinant Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PTK6重組小鼠 PTK6 / Brk 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)

ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 ,英文名: ACE ELISA Kit

人旋毛蟲抗體(TrichinellaAb)ELISA檢測試劑盒HumanTrichinellaantibodyELISAKit 96T/48T

大鼠c-fos 免疫試劑盒 Rat c-fos ELISA Kit

CLIAKitforsE-selectin(HumansolubleE-selectin)ELISAKit人可溶性E選擇素規(guī)格:48T/96T

*核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒20

ELISAKitPV-IgG人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG規(guī)格:48T/96T
小鼠雌三醇(E3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human glycated hemoglobin A1c (GHbA1c) ELISA Kit 人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒

HumanBradykinin,BKELISAKit 人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanBeta-Endorphin,β-EPELISA試劑盒人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物種子葉綠體粗提分離試劑盒20

HumanTacrolimus-FK506ELISAKit人*(FK506)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol*人載脂蛋白B1(apo-B1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人載脂蛋白A4apo-A4ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人載脂蛋白A2(apo-A2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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