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更新時(shí)間:2017-07-18 12:41:56瀏覽次數(shù):157次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)φX174RF Ⅰ DNA30μg使用說明書規(guī)格及成分:
φX174RF Ⅰ DNA30μg使用說明書產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
φX174RF Ⅰ DNA30μg使用說明書使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。
PDCD1LG2重組小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
L選擇素(SELL)重組蛋白 Recombinant Selectin, Leukocyte (SELL)
PNLIPRP2重組人 Galactolipase / PNLIPRP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Interleukin-4 蛋白
ACVRL1 Protein Rat 重組大鼠 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
纖溶抑制因子(TAFI)重組蛋白 Recombinant Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI)
SLITRK1重組人 SLITRK1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
ARL6IP6重組人 ARL6IP6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
YWHAE Protein Human 重組人 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)重組蛋白 Recombinant Hexosaminidase B Beta (HEXb)
IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Interleukin-4 蛋白
EPHA1重組小鼠 EphA1 / EPH receptor A1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACVR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NAA10重組人 NAA10 / ARD1A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒 Human VIP ELISA Kit
人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-Ku-Ab ELISA Kit
RatLeptospiraIgG,LepIgGELISA試劑盒大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISA試劑盒人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLactoferrin,LTF/LFELISAKit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human glycated albumin (GA) ELISA Kit 人糖化白蛋白(GA)ELISA試劑盒
HumanHomocysteicacid,HcyELISAKit 人同型半*(Hcy)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBence-Jonesprotein,BJPELISA試劑盒人本周蛋白(BJP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物種子活性葉綠體分離試劑盒20次
Humantartrate-resistantacidphosphatase5b,TRACP-5bELISAKit人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
φX174RF Ⅰ DNA30μg使用說明書人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人整合素αⅤβ3(IntegrinαⅤβ3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人真胰島素(TI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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