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M13mp18DNA10μg使用說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2017-07-18 12:39:38瀏覽次數(shù):149次

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M13mp18DNA10μg使用說(shuō)明書(shū)是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。

M13mp18DNA10μg使用說(shuō)明書(shū)詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

M13mp18DNA10μg使用說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲(chóng)病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲(chóng)病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
M13mp18DNA10μg使用說(shuō)明書(shū)規(guī)格及成分:

M13mp18DNA10μg使用說(shuō)明書(shū)使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無(wú)菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋?zhuān)绶殖?/span> 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長(zhǎng)情況決定去留。
UNC5B重組大鼠 UNC5B / UNC5H2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1 0.5mgCX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趨化因子受體1抗原

TXNRD1重組人 TXNRD1 / TRXR1 蛋白 (aa 161-647, His 標(biāo)簽) Protein

IL37 Protein Human 重組人 IL37 / IL1F7 / IL-1H4 蛋白

CD7 Protein Mouse 重組小鼠 CD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)重組蛋白 Recombinant Inectin 1 (ITLN1)

CPB1重組人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CCL13重組人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ALCAM Protein Human 重組人 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1 0.5mgCX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趨化因子受體1抗原

IL37 Protein Human 重組人 IL37 / IL1F7 / IL-1H4 蛋白

UNC5B重組大鼠 UNC5B / UNC5H2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD7 Protein Mouse 重組小鼠 CD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TXNRD1重組人 TXNRD1 / TRXR1 蛋白 (aa 161-647, His 標(biāo)簽) Protein
大鼠早老素1(PS-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管緊張素Ⅰ(Ang-)免疫試劑盒 Human angiotension ,Ang- ELISA Kit

人抗Q熱抗體(anti-Q-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-Q-Ab ELISA Kit

RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humangolgiprotein73,GP-73ELISA試劑盒人高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanLactateDehydrogenaseLDHELISAKit人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒

HumanTroponin,Tn-ELISAKit 人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISA試劑盒人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物中性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(neutralinvertase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(胞質(zhì))20

Humantenascin-R,TN-RELISAKit人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
M13mp18DNA10μg使用說(shuō)明書(shū)人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人中期因子(MK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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