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更新時間:2017-07-18 12:38:50瀏覽次數(shù):223次

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PCR LIC 克隆套裝1μg圖片是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達 107CFU/μg。

PCR LIC 克隆套裝1μg圖片規(guī)格及成分:

PCR LIC 克隆套裝1μg圖片產(chǎn)品及特點:
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達 107CFU/μg。 DH10Bac 細胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復制子、*抗性基因、att Tn7 位點和 lac Zα-互補因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍白斑篩選。
PCR LIC 克隆套裝1μg圖片詳細說明書:

PCR LIC 克隆套裝1μg圖片使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以 100 μL 感受態(tài)細胞為例。
3. 待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. SOC 培養(yǎng)基進行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長情況決定去留。
IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽) Protein

GABA/KLH γ1氨基丁酸偶聯(lián)血藍蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基丁酸偶聯(lián)血藍蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (His 標簽) Protein

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 (His 標簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)重組蛋白 Recombinant Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78)

AHSG重組人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 蛋白 (His 標簽) Protein

IL31重組人 IL-31 / IL31 蛋白 (His 標簽) Protein

ICAM2 Protein Human 重組人 ICAM-2 / CD102 蛋白 (His 標簽)
GABA/KLH γ1氨基丁酸偶聯(lián)血藍蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基丁酸偶聯(lián)血藍蛋白

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽) Protein

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 (His 標簽)

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (His 標簽) Protein
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人壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE/ADAM17)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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