當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標(biāo)記及檢測產(chǎn)品>> 顯影定影套裝1套說明書
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更新時間:2017-07-17 12:49:50瀏覽次數(shù):128次
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一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進(jìn)行。
顯影定影套裝1套說明書詳細(xì)說明書:
顯影定影套裝1套說明書確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
顯影定影套裝1套說明書步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠游離β絨毛膜*(f-βCG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒 Human TARC ELISA Kit
測試盒名稱 測定方法 規(guī)格
RatL-SelectinELISA試劑盒大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowth-associatedprotein43,GAP-43ELISA試劑盒人生長相關(guān)蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeptinreceptor,LR/Ob-RELISAKit人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠簇集蛋白(CLU)ELISA試劑盒 ,英文名: CLU ELISA Kit
人血紅蛋白H(HbH)ELISA檢測試劑盒HumanHemoglobinH,HbHELISAKit 96T/48T
大鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒 Rat Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
英文名稱RatCystatinCELISAKit大鼠胱抑素C(CysC)規(guī)格:96T/48T
酵母硫氰酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG規(guī)格:48T/96T
小鼠肝細(xì)胞生長因子受體(HGFR/ c-MET)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human varicella zoster virus IgG (VZV-IgG) ELISA Kit 人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒
HumanAnti-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-trophoblastantibody,ATAELISA試劑盒人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體(ATA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法定量檢測試劑盒(超氧陰離子)20次
HumanTransferfactor,TFELISAKit人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
13(R)-HODE (100 ug) 13R-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13(R)-HODE
CUDC-101 (50 mg) 7-[[4-[(3-ethynylpxenyl)amino]-7-metxoxy-6-inoneazolinyl]oxy]-N-xy7noxy-hept*
Cal-520, AM Cal-520, AM
Oxandrolone (25 mg) (4bS,7S,9aS,9bR,11aS)-tetradecaxy7no-7-xy7noxy-4aS,6aS,7-trimetxyl-cyclopenta[5,6]naphtho[1,2-c]pyran-2(1H)-one; Anavar|NSC 67068|Oxandrin|SC 11585; Oxandrolone
Dihomo-γ-Linolenic Acid etxyl ester (10 mg) 8Z,11Z,14Z-eicosatrienoic acid, etxyl ester; etxyl DGLA; Dihomo-γ-Linolenic Acid etxyl ester
SN50; AAVALLPAVLLALLAPVQRKRQKLMP NF-κB Inhibitor, SN50
GRPP (human)Arg-Ser-Leu-Gln-Asp-Thr-Glu-Glu-Lys-Ser-Arg-Ser-Phe-Ser-Ala-Ser-Gln-Ala-Asp-Pro-Leu-Ser-Asp-Pro-Asp-Gln-Met-Asn-Glu-Asp
β- Amyloid (1-38)Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly
[Phe7] Dynorphin A (1-7), amide, porcineTyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Phe- NH2
BNP-32, humanSer-Pro-Lys-Met-Val-Gln-Gly-Ser-Gly-Cys-Phe-Gly-Arg- Lys-Met-Asp-Arg-Ile-Ser-Ser-Ser-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Lys- Val-Leu-Arg-Arg-His(Disulfide bridge:Cys10-Cys26)
Pancreatic Polypeptide (1-17)-(Ala31,Aib32)-Neuropeptide Y (18-36) (human)Ala-Pro-Leu-Glu-Pro-Val-Tyr-Pro-Gly-Asp-Asn-Ala-Thr-Pro-Glu-Gln-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Ala-Aib-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH2
顯影定影套裝1套說明書正戊烷Pentane進(jìn)分500mL
MD7-14透析袋(半周長7mm,直徑4mm,截留分子量14000Da) 5米/卷0
T0376-5GThymine 胸腺嘧啶65-71-45g
DNA Marker II250ul
Lipopolysaccharides, Escherichia coli 055:B5
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