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更新時(shí)間:2017-07-17 12:50:17瀏覽次數(shù):142次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)ECL 法*雜交檢測試劑盒5次規(guī)格使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
ECL 法*雜交檢測試劑盒5次規(guī)格確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
ECL 法*雜交檢測試劑盒5次規(guī)格步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD1)ELISA試劑盒 ,英文名: SCD1 ELISA Kit
*輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)ELISA檢測試劑盒Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 96T/48T
大鼠白介素12(IL-12/P40)免疫試劑盒 Rat Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA KIT
CLIAKitforTARC/CCL17(Humanthymusactivationregulatedchemokine)ELISAKit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格:48T/96T
人體MethyltetrahydrofolatereductaseRFLP基因分析試劑盒20次
ELISAKitARPA/Rib-P人抗核糖體P蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
小鼠V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)ELISA試劑盒 ,英文名: JUN ELISA Kit
人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA檢測試劑盒Humanβ-subunitsofhemoglobin,HB-βELISAKit 96T/48T
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1/Collagenase I)免疫試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 1,MMP-1/Collagenase I ELISA kit
英文名稱RatCCL17ELISAKit大鼠CCL17規(guī)格:96T/48T
蘭花Malmgen培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
ELISAKitFⅨ人*Ⅸ規(guī)格:48T/96T
小鼠肝脂酶(HL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒
Humanferritin,FEELISAKit 人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAnti-tissuetranGSlutaminaseIgA,tTG-IgAELISA試劑盒人抗組織轉(zhuǎn)*酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氧化型*(GSSG)濃度高效液相色譜定量檢測試劑盒50次
HumanTransformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9-OxoODE (100 ug) 9-oxo-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9-KODE; 9-OxoODE
CUDC-101 (10 mg) 7-[[4-[(3-ethynylpxenyl)amino]-7-metxoxy-6-inoneazolinyl]oxy]-N-xy7noxy-hept*
Rhod-FF, AM Rhod-FF, AM
Palmiaidic Acid (500 mg) (9E)-hexadecenoic acid; 9-trans-Hexadecenoic acid; Palmiaidic Acid
Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide (10 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-8Z,11Z,14Z-eicosatrienamide; Dihomo-γ-Linolenoyl Ethanolamide
Benzylpenicillin wo7ium salt Penicillin G wo7ium
Growth Hormone Releasing Factor, GRF, (1-40), humanTyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-Ala
β- Amyloid (1-33)Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly
[Phe2]-TRHPyr-Phe-Pro- NH2
BNP (1-21), Pro (Human)His-Pro-Leu-Gly-Ser-Pro-Gly-Ser-Ala-Ser-Asp-Leu-Glu-Thr-Ser-Gly-Leu-Gln-Glu-Gln-Arg
PACAP-Related Peptide (PRP), humanAsp-Val-Ala-His-Gly-Ile-Leu-Asn-Glu-Ala-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Asp-Gln-Leu-Ser-Ala-Gly-Lys-His-Leu-Gln-Ser-Leu-Val-Ala
ECL 法*雜交檢測試劑盒5次規(guī)格溴代本BromobenzeneCP500mL
MD25-14透析袋(半周長25mm,直徑16mm,截留分子量14000Da) 500英尺(152.4米)0
16000044-500MLFetal Bovine Serum (Characterized FBS) 胎牛血清(優(yōu)級(jí))--500ml
DL2000 DNA Ladder500ul
亞麻酸1g
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