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更新時(shí)間:2017-07-17 12:47:39瀏覽次數(shù):148次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)雜交管 (35×300mm)1個(gè)保存使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
雜交管 (35×300mm)1個(gè)保存詳細(xì)說明書:
雜交管 (35×300mm)1個(gè)保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
雜交管 (35×300mm)1個(gè)保存步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠音猬因子(SHH)ELISA試劑盒 ,英文名: SHH ELISA Kit
Duck interleukin 4 (IL-4) ELISA Kit 鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
MousefactorB,BFELISAKit 小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanechinococcusantibodyIgGELISAKit人包蟲抗體IgG規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitcGMP大鼠環(huán)磷酸鳥苷規(guī)格:48T/96T
大鼠總*(TC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血紅素氧合酶2(HO-2)免疫試劑盒 Human heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit
人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒 ,英文名: AFA/snoRNP/U3RNP ELISA Kit
RatInterleukin1receptorantagonist,IL-1raELISA試劑盒大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGliadinIgAELISA試劑盒人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin1α,IL-1αELISAKit人白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠睪酮(T)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cyclophilin B (CyPB) ELISA Kit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)ELISA試劑盒
HumanPodocalyxin,PCXELISAKit 人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白(PCX)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAnti-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒人抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物線粒體粗提分離試劑盒10次
HumanTriggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,TREM-1ELISAKit人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
9(S)-HODE (1 mg) 9S-xy7noxy-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9(S)-HODE
RVX-208 (10 mg) 2-[4-(2-xy7noxyethoxy)-3,5-dimetxylpxenyl]-5,7-dimetxoxy-4(3H)-inoneazolinone
Annexin V-mFluor Violet 450偶聯(lián)物 Annexin V-mFluor Violet 450 conjugate
Palmiaidic Acid metxyl ester (1 g) (9E)-hexadecenoic acid, metxyl ester; 9-trans-Hexadecenoic acid metxyl ester; Palmiaidic Acid metxyl ester
γ-Linolenic Acid (250 mg) 6Z,9Z,12Z-octadecatrienoic acid; GLA; γ-Linolenic Acid
Ophtalmokalixan Kanamycin Sulfate, USP
G-R-G-E-S-P (Inactive control)Gly-Arg-Gly-Glu-Ser-Pro
α-Neoendorphin (1-8)Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Lys-Tyr
[Phe1,Ser2]-TRAP-6Phe-Ser-Leu-Leu-Arg-Asn
Biotin-Somatostatin-14Biotin-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (Disulfide bridge:Cys3-Cys14)
PACAP-38 (16-38) (human, chicken, mouse, ovine, porcine, rat)Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Ala-Ala-Val-Leu-Gly-Lys-Arg-Tyr-Lys-Gln-Arg-Val-Lys-Asn-Lys-NH2
雜交管 (35×300mm)1個(gè)保存本甲醛penzel7exy7eAR500mL
20476DL-高絲安酸1927-25-91g0
P8169-500GPHYTAGEL(GEUAM GUM) 植物凝膠71010-52-1500g
Tris-乙酸-EDTA緩沖液500ml
亮綠SF5g
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