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聚乙二醇100g保存

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更新時間:2017-07-17 12:45:53瀏覽次數(shù):142次

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聚乙二醇100g保存一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

聚乙二醇100g保存使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37
反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70加熱 510 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 7 M CH3COONH4pH 4.5)。如使用 CH3COONa 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL2.5 倍)的冷無水乙醇,-20放置 3060 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 58 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
聚乙二醇100g保存詳細說明書:

聚乙二醇100g保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 5-12,一般情況下可以在 55進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
聚乙二醇100g保存步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
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CLIAKitforTAF(Humantumorangiogenesisfactors)ELISAKit人腫瘤血管生長因子規(guī)格:48T/96T

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HumanThymopentin,TP-5ELISAKit 人*(TP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humananti-rubellavirusIgGantibody,anti-RVIgGELISA試劑盒人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體(anti-RVIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物細胞周期G1期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10

Humantubularbasementmembraneantibogy,TBMELISAKit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
15-OxoEDE 50 ug     15-oxo-11Z13E-eicosadienoic acid; 15-KEDE 15-OxoEDE

LEI-106 1 mg    

Annexin V, 重組的     Annexin V, Recombinant

Lignoceroyl Ethanolamide 100 mg     N-2-xy7noxyetxyl-tetracos*; Lignoceroyl Ethanolamide

5,811-Eicosatriynoic Acid 1 mg     5,811-eicosatriynoic acid; 5,8,11-ETI; 5,811-Eicosatriynoic Acid

Dietxylenetriamine NONOate DETA NONOate; Z-     NOC-18
gp38Arg-Val-Thr-Ala-Ile-Glu-Lys-Tyr-Leu-Gln-Asp-Gln-Ala- Arg-Leu-Asn-Ser-Trp-Gly-Cys-Ala-Phe-Arg-Gln-Val-Cys(Disulfide bridge:Cys20-Cys26)

α-Gliadin (57–73)Gln-Leu-Gln-Pro-Phe-Pro-Gln-Pro-Glu-Leu-Pro-Tyr-Pro-Gln-Pro-Gln-Ser

[Nle13]-MotillinPhe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Nle-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln

Biotin-Neuromedin BBiotin-Gly-Asn-Leu-Trp-Ala-Thr-Gly-His-Phe-Met-NH2

P60c-src Substrate II, PhosphorylatedAc-Ile-Tyr(PO3H2)-Gly-Glu-Phe-NH2
聚乙二醇100g保存本磺酰錄Benzenesulfonyl chlorideAR500mL

04635-500MG鹽酸*1115-70-4500MG0

A0175-10GAlbumin Bovine,Fraction V,Salt-free form pH 5.1 牛血清白蛋白(低鹽)9048-46-810g

100bp Plus DNA Ladder250ul

植物血凝素5mg

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