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Denhardt 溶液,50×100mL規(guī)格

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Denhardt 溶液,50×100mL規(guī)格一般使用 0.1×SSC做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

Denhardt 溶液,50×100mL規(guī)格使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37
反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70加熱 510 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 7 M CH3COONH4pH 4.5)。如使用 CH3COONa 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL2.5 倍)的冷無水乙醇,-20放置 3060 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 58 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
Denhardt 溶液,50×100mL規(guī)格確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 5-12,一般情況下可以在 55進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 1-2 小時(shí),延長到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
Denhardt 溶液,50×100mL規(guī)格步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPG2 ELISA Kit

人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA檢測試劑盒Humanmatrixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAKit 96T/48T

鴨白介素1(IL-1)免疫試劑盒 Duck Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit

CLIAKitforp2(Humanmyelinprotein2)ELISAKit人神經(jīng)髓鞘蛋白規(guī)格:48T/96T

四環(huán)素溶液10毫克/毫升

ELISAKitLTB4人白三烯B4規(guī)格:48T/96T
小鼠白介素13(IL13)ELISA試劑盒 ,英文名: IL13 ELISA Kit

人血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA檢測試劑盒Human50%complementhemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T

大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)免疫試劑盒 Rat A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit

英文名稱RatMGα1ELISAKit大鼠α1微球蛋白(MGα1)規(guī)格:96T/48T

咖啡環(huán)氨酸(cyclamate)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20

ELISAKitFK人趨化因子規(guī)格:48T/96T
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human growth regulated oncogene beta / melanoma growth stimulating factor (GRO beta /CXCL 人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL

HumanvisfatinELISAKit 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humananti-redcellantibodyELISA試劑盒人抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物細(xì)胞葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

HumanTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKit人壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
11R-HEDE 250 ug     11R-xy7noxy-12E,14Z-eicosadienoic acid; 11R-HEDE

Hexanoyl Glycine 50 mg     NSC 224460; N-1-oxohexyl-glycine

mFluor Violet 450-dUTP 溶解于1 mM Tris緩沖液(pH 75     mFluor Violet 450-dUTP 1 mM in Tris Buffer pH 7。5

Myristoyl Ethanolamide 5 mg     N-2-xy7noxyetxyl-tetradec*; AM 3165|Comperlan MM|Schercomid MME Myristoyl Ethanolamide

11Z),14Z),17Z-Eicosatrienoic Acid 5 mg     11Z,14Z17Z-eicosatrienoic acid; 11Z),14Z),17Z-Eicosatrienoic Acid

3S,     Ryanodine
gp100 (476-485)Val-Leu-Tyr-Arg-Tyr-Gly-Ser-Phe-Ser-Val

α-Conotoxin IMIGly-Cys-Cys-Ser-Asp-Pro-Arg-Cys-Ala-Trp-Arg-Cys- NH2(Disulfide bridge: Cys2-Cys8, Cys3-Cys12)

[Met5,Arg6,Phe7] Enkephalin, amideTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Phe-NH2

Biotin-LC-Neurogranin (28-43)Biotin-LC-Ala-Ala-Lys-Ile-Gln-Ala-Ser-Phe-Arg-Gly-His-Met-Ala-Arg-Lys-Lys

p5 Ligand for Dnak and and DnaJCys-Leu-Leu-Leu-Ser-Ala-Pro-Arg-Arg
Denhardt 溶液,50×100mL規(guī)格正癸烷DecaneAR100mL

C2227*鹽酸93107-08-55G0

A5253-100GAlbumin Egg 卵清蛋白()9006-59-1100g

Water DNA Kit100T

L-半胱安酸100g

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