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鮭魚(yú)精 DNA 溶液1mL特點(diǎn)

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鮭魚(yú)精 DNA 溶液1mL特點(diǎn)一般使用0.1×SSC做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

鮭魚(yú)精 DNA 溶液1mL特點(diǎn)詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

鮭魚(yú)精 DNA 溶液1mL特點(diǎn)使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37
反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70加熱 510 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 7 M CH3COONH4pH 4.5)。如使用 CH3COONa 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM
6. 加入 87.5 μL2.5 倍)的冷無(wú)水乙醇,-20放置 3060 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過(guò)第 58 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
鮭魚(yú)精 DNA 溶液1mL特點(diǎn)確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 5-12,一般情況下可以在 55進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針?lè)肿拥奈稽c(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤(rùn)。
2. 將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒(méi)入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 1-2 小時(shí),延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過(guò)程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
鮭魚(yú)精 DNA 溶液1mL特點(diǎn)步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過(guò)程中,一定不要使印跡。
大鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人性別決定區(qū)Y蛋白(SRY)免疫試劑盒 Human Sex-determining region Y protein,SRY ELISA kit

檸檬酸合酶(CS)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 25/24

RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISA試劑盒人鳥(niǎo)苷酸解離抑制因子(GDI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒 ,英文名: AQP-4 ELISA Kit

人血清一氧化氮(NO)ELISA檢測(cè)試劑盒Humannitricoxide,NOELISAKit 96T/48T

蝌蚪雌二醇(E2)免疫試劑盒 Tadpole Estradiol,E2 ELISA kit

CLIAKitforPPAR-Gamma(HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorGamma)ELISAKit人過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ規(guī)格:48T/96T

石蠟切片組織IKB-ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

ELISAKitSP-C人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C規(guī)格:48T/96T
小鼠骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human growth hormone binding protein (GHBP) ELISA Kit 人生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白(GHBP)ELISA試劑盒

HumanSecretinELISAKit 人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humananti-respiratorysyncytialvirusantibody,RSVELISA試劑盒人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物細(xì)胞葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

HumanTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit人壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
15S-HEDE 25 ug     15S-xy7noxy-11Z13E-eicosadienoic acid; 15S-HEDE

Hexanoyl Glycine 500 mg     NSC 224460; N-1-oxohexyl-glycine

Fluorescein-dUTP 溶解于1 mM Tris緩沖液(pH 75     Fluorescein-dUTP 1 mM in Tris Buffer pH 7。5

Myristoyl Ethanolamide 50 mg     N-2-xy7noxyetxyl-tetradec*; AM 3165|Comperlan MM|Schercomid MME; Myristoyl Ethanolamide

11Z),14Z),17Z-Eicosatrienoic Acid 50 mg     11Z,14Z,17Z-eicosatrienoic acid; 11Z),14Z),17Z-Eicosatrienoic Acid

emmonieted Ruthenium Oxychloride     Ruthenium Red
gp100 (570-579)Ser-Leu-Ala-Asp-Thr-Asn-Ser-Leu-Ala-Val

α-Conotoxin MIGly-Arg-Cys-Cys-His-Pro-Ala-Cys-Gly-Lys-Asn-Tyr-Ser-Cys- NH2

[Met5,Arg6] EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg

Biotin-LC-Protein Kinase G Substrate; Biotin-LC-G-SubtideBiotin-LC-Gln-Lys-Arg-Pro-Arg-Arg-Lys-Asp-Thr-Pro

P55-TNFRLeu-Pro-Gln-Ile-Glu-Asn-Val-Lys-Gly-Thr-Glu-Asp
鮭魚(yú)精 DNA 溶液1mL特點(diǎn)乙酸甲酯metxyl acetate

17104-019膠原酶IV(原裝)9001-12-11G0

A0332-100GAlbumin Bovine,Fraction V 牛血清白蛋白(五組分)9048-46-8100g

酵母DNA提取試劑盒50T

L-Cysteine500g

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