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更新時間:2017-07-17 12:42:38瀏覽次數(shù):133次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL保存步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL保存使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL保存詳細說明書:
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠乙酰輔酶A羧化酶α(ACACα)ELISA試劑盒 ,英文名: ACACα ELISA Kit
Mouse Annexin V (ANX- V) ELISA Kit 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒
MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkit 小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumandermato-pontin,DPISAKit人皮膚蛋白規(guī)格:48T/96T
細胞Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitRANKL大鼠核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96T
小鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA試劑盒 ,英文名: TNNI2 ELISA Kit
人血栓前體蛋白(TpP)ELISA檢測試劑盒Humanthrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 96T/48T
大鼠酸性磷酸酶(ACP)免疫試劑盒 Rat Acid Phosphatase,ACP ELISA Kit
英文名稱RatglialfibrillaryacidicproteinELISAKit大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
環(huán)境傷*B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴增檢測試劑盒20次
ELISAKitTARC/CCL17人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格:48T/96T
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human growth regulated oncogene alpha / melanoma growth stimulating factor (GRO alpha/CXCL 人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL
Humanpyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISAKit 人丙酮酸脫輕酶E1(PDHE1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-Qfeverantibody,anti-Q-AbELISA試劑盒人抗Q熱抗體(anti-Q-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒(含抗體)10次
Humantumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,TRAIL-R3ELISAKit人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
11(R)-HEDE (50 ug) 11R-xy7noxy-12E,14Z-eicosadienoic acid; 11(R)-HEDE
Hexanoyl Glycine (10 mg) NSC 224460; N-1-oxohexyl-glycine
iFluor 700-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 700-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Myristoyl Ethanolamide (10 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-tetradec*; AM 3165|Comperlan MM|Schercomid MME; Myristoyl Ethanolamide
11(Z),14(Z),17(Z)-Eicosatrienoic Acid (10 mg) 11Z,14Z,17Z-eicosatrienoic acid; 11(Z),14(Z),17(Z)-Eicosatrienoic Acid
N-Acetyl-5-metxoxytryptamine; NSC 113928; Regulin; NSC 56423 Melatonin
gp100 (178-187)Met-Leu-Gly-Thr-His-Thr-Met-Glu-Val
α-Conotoxin GIGlu-Cys-Cys-Asn-Pro-Ala-Cys-Gly-Arg-His-Tyr-Ser-Cys-NH2 (Disulfide bridge: Cys2-Cys7, Cys3-Cys13)
[Met5,Arg6,Gly7,Leu8] EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Gly-Leu
Biotin-Kinase Domain of Insulin Receptor (5)Biotin-Thr-Arg-Asp-Ile-pTyr-Glu-Thr-Asp-pTyr-pTyr-Arg-Lys
p3K truncated, (Lys 58 Lys 60 Lys 63) Ea(54–68)Phe-Glu-Ala-Lys-Gly-Ala-Lys-Ala-Asn-Lys-Ala-Val-Asp
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL保存二乙胺DietxylamineAR500mL
CA1011-100mg脫落酸(ABA)14375-45-2100mg0
H3760-5GHemoglobin 牛血紅蛋白9008-02-05g
Virus DNA-RNA Isolation Kit100T
L-天*25g
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