當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標(biāo)記及檢測產(chǎn)品>> 去離子甲酰胺100mL說明書
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更新時間:2017-07-17 12:42:08瀏覽次數(shù):228次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)去離子甲酰胺100mL說明書步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
去離子甲酰胺100mL說明書使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
去離子甲酰胺100mL說明書詳細說明書:
去離子甲酰胺100mL說明書確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒 ,英文名: AChE ELISA Kit
人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)ELISA檢測試劑盒Humananti-Ku-antibodyELISAKit 96T/48T
大鼠γ*-半*合成酶(γ-GCS)免疫試劑盒 Rat γ glutamylcysteine synthetase,γ-GCS ELISA kit
CLIAKitforTAb(HumanParathyroidHormoneRelatedProtein)ELISAKit人甲狀腺素抗體規(guī)格:48T/96T
人體RASSF1A基因甲基化檢測試劑盒20次
ELISAKitLMA人抗肝細胞膜抗體規(guī)格:48T/96T
鵝P450*側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血栓素A2(TX-A2)免疫試劑盒 Human Thromboxane A2,TX-A2 ELISA Kit
人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒 ,英文名: EMA IgA ELISA Kit
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGamma-aminobutyricacid,GABAELISA試劑盒人γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humaninterferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒
HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-presynapticmembraneantibody,PsmAbELISA試劑盒人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞染色體分離試劑盒20次
HumanTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISAKit人特異生長因子/相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
15(S)-HETrE (100 ug) 15S-xy7noxy-8Z,11Z,13E-eicosatrienoic acid; 15(S)-HETrE
β-Nicotinamide Mononucleotide (100 mg) β-NMN; 3-(aminocarbonyl)-1-(5-O-phosphono-β-D-ribofuranosyl)-pyridinium, inner salt
iFluor 633-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 633-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Pentadecanoyl Ethanolamide (100 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-pentadec*; Pentadecanoyl Ethanolamide
5(Z),8(Z),11(Z)-Eicosatrienoic Acid (1 mg) 5Z,8Z,11Z-eicosatrienoic acid; Mead Acid; 5(Z),8(Z),11(Z)-Eicosatrienoic Acid
4-[[4-Oxo-2-thioxo-3-[3-trifluorometxyl)pxenyl]-5-thiazolidinylidene]metxyl]benzoic acid; CFTR(inh)-172 CFTR Inhibitor-172
Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), humanAsp-Ala-Glu-Asn-Leu-Ile-Asp-Ser-Phe-Gln-Glu-Ile-Val
α-CGRP (32-37) (canine, mouse, porcine, rat)Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2
[Met5, Lys6,7] a-Neo-Endorphin (1-7)Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Lys-Lys
Biotin-Intermedin (rat)Biotin-Pro-His-Ala-Gln-Leu-Leu-Arg-Val-Gly-Cys-Val-Leu-Gly-Thr-Cys-Gln-Val-Gln-Asn-Leu-Ser-His-Arg-Leu-Trp-Gln-Leu-Val-Arg-Pro-Ser-Gly-Arg-Arg-Asp-Ser-Ala-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser-Pro-His-Ser-Tyr-NH2
P1Gly-Ser-Phe-Leu-Val-Arg-Glu-Ser
去離子甲酰胺100mL說明書乙基本etxyl-benzenCP500mL
CA1071-5g錄化乙酰*60-31-15g0
C2010-25MGCon A Type Ⅳ 刀豆蛋白A Ⅳ11028-71-025mg
TRIzol LS Reagent100ml
L-Arginine, Monoxy7nochloride100g
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