當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標(biāo)記及檢測產(chǎn)品>> 超級雜交液 ( 原位雜交 )10mL說明書
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
聯(lián)系方式:陳經(jīng)理查看聯(lián)系方式
更新時間:2017-07-17 12:41:28瀏覽次數(shù):195次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)超級雜交液 ( 原位雜交 )10mL說明書詳細(xì)說明書:
超級雜交液 ( 原位雜交 )10mL說明書使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
超級雜交液 ( 原位雜交 )10mL說明書確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
超級雜交液 ( 原位雜交 )10mL說明書步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠乙酰*(Ach)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子4(STAT4)免疫試劑盒 human STAT4 ELISA Kit
單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmacrophageinflammatoryprotein3α,MIP-3αELISA試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHeatShockFactor1,HSF1ELISA試劑盒人熱休克因子1(HSF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanleukocyteantigenE,HLA-EELISAKit人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 ,英文名: ACE ELISA Kit
人血吸蟲(schistosoma)ELISA檢測試劑盒humanschistosomaELISAKit 96T/48T
大鼠CD63分子(CD63)免疫試劑盒 Rat Cluster of Differentiation 63,CD63 ELISA Kit
CLIAKitforsEPCRELISAKit大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體規(guī)格:48T/96T
*化學(xué)底物復(fù)合試劑盒5次
ELISAKitKLK11人*11規(guī)格:48T/96T
小鼠酶(CAT)ELISA 試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝
Rat immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
humanNoradrenaline,NAELISAKit 人*(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAnti-phosphatidylserineantibody,APSAELISA試劑盒人抗磷脂酰*抗體(APSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20次
HumantypeⅡcollagenhelicalpeptide,HELIX-ⅡELISAKit人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
8(S)-HETrE (100 ug) 8S-xy7noxy-9E,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; 8(S)-HETrE
Carprofen (1 g) Carprodyl|NSC 297935; 6-chloro-α-metxyl-9H-carbazole-2-acetic acid
iFluor 514-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 514-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Prostaglandin E1 etxyl ester (10 mg) 11α,15S-dixy7noxy-9-oxo-prost-13E-en-1-oic acid, etxyl ester; Alprostadil etxyl ester|PGE1 etxyl ester; Prostaglandin E1 etxyl ester
13(Z)-Docosenoic Acid (100 mg) 13Z-docosenoic acid; Erucic Acid; 13(Z)-Docosenoic Acid
α-Carboxybenzylpenicillin diwo7ium salt Carbenicillin diwo7ium
GMAP (16-41), amideLeu-Gln-Ser-Glu-Asp-Lys-Ala-Ile-Arg-Thr-Ile-Met-Glu-Phe-Leu-Ala-Phe-Leu-His-Leu-Lys-Glu-Ala-Gly-Ala-Leu-NH2
α-CGRP (23-37) (human)Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2
[Lys8]-Conopressin SCys-Ile-Ile-Arg-Asn-Cys-Pro-Lys-Gly-NH2(Disulfide bridge:Cys1-Cys6)
Biotin-IkB Inhibitor, amideBiotin-Asp-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Leu-Asp-Ser-Met-Lys-Asp-NH2
OVA(323-339)Ile-Ser-Gln-Ala-Val-His-Ala-Ala-His-Ala-Glu-Ile-Asn-Glu-Ala-Gly-Arg
超級雜交液 ( 原位雜交 )10mL說明書二異丙胺DiisopropylamineCP250ml
CA1111-5g酸性品紅3244-88-05g0
I5500-10MGInsulin 牛胰島素11070-73-810mg
Tissue RNA Kit100T
Lanthanum Acetate25g
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。