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更新時間:2017-07-17 12:38:46瀏覽次數(shù):159次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)超級雜交液 B(含甲酰胺)100mL規(guī)格詳細說明書:
超級雜交液 B(含甲酰胺)100mL規(guī)格使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第 8 步之后進行。
超級雜交液 B(含甲酰胺)100mL規(guī)格確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
超級雜交液 B(含甲酰胺)100mL規(guī)格步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒 ,英文名: ALDH ELISA Kit
人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA檢測試劑盒Humananti-PL7-antibodyELISAKit 96T/48T
大鼠γ分泌酶免疫試劑盒 Rat γ-secretase ELISA kit
CLIAKitforTA(Humananti-teichoicacidantibody)ELISAKit人抗磷壁酸抗體規(guī)格:48T/96T
人體RUNX3(AML-2)基因引物對2OD
ELISAKitLSP人抗肝特異性脂蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
鵝促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血吸蟲抗體(IgM)免疫試劑盒 Human schistosoma haematobium antibody IgM ELISA kit
人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒 ,英文名: AKA ELISA Kit
RatInsulin,INSELISA試劑盒大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanfrizzledhomolog8,FZD8ELISA試劑盒人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterferonα/βReceptor,IFN-α/βRELISAKit人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠漢坦病毒(HV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Adrenaline (EPI) ELISA Kit 人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒
humanEndothelin1,ET-1ELISAKit 人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-parainfluenzavirusIgMantibody,anti-PIVIgMELISA試劑盒人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞壁鈣熒光白(Calcofluorwhite;CFW)熒光染色試劑盒20次
Humantyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5(S)-HETrE (250 ug) 5S-xy7noxy-6E,8Z,11Z-eicosatrienoic acid; 5(S)-HETrE
(S)-Ketoprofen (100 mg) (S)-2-(3-benzoylpxenyl)Propionic Acid|Dexketoprofen; (S)-3-benzoyl-α-metxyl-benzeneacetic acid
iFluor 350-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 350-streptavidin conjugate 1 mg/ml
α-Piperidinobutiopxenone (xy7nochloride) (5 mg) 1-pxenyl-2-(1-piperidinyl)-1-butenone, monoxy7nochloride; α-Piperidinobutiopxenone (xy7nochloride)
Docosatrienoic Acid (100 mg) 13Z,16Z,19Z-docosatrienoic acid; Docosatrienoic Acid
D-( Ampicillin wo7ium
Glycoprotein Hormone a (32-46) amideCys-Phe-Ser-Arg-Ala-Tyr-Pro-Thr-Pro-Leu-Arg-Ser-Lys-Lys-Thr-NH2
α-Casein (90-95)Arg-Tyr-Leu-Gly-Tyr-Leu
[Lys8,Asn9] Neurotensin LANT-6 (8-13)Lys-Asn-Pro-Tyr-Ile-Leu
Biotin-Gastrin Releasing Peptide, humanBiotin-Val-Pro-Leu-Pro-Ala-Gly-Gly-Gly-Thr-Val-Leu-Thr-Lys-Met-Tyr-Pro-Arg-Gly-Asn-His-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2
OV-1, SheepLys-Asn-Leu-Arg-Arg-Ile-Ile-Arg-Lys-Ile-Ile-His-Ile-Ile-Lys-Lys-Tyr-Gly
超級雜交液 B(含甲酰胺)100mL規(guī)格1,1,2-三錄乙烷1,1,2-TrichloroethaneCP500mL
CA1141-5g吖啶黃素8048-52-05g0
L2646-5MGPHA-M (Phytohemagglutinin M) 植物血球凝聚集素M9008-97-35mg
拭子DNA提取試劑盒50T
L-丙安酸50g
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