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更新時間:2017-07-17 12:39:14瀏覽次數(shù):103次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網Sephadex G50 介質10mL規(guī)格詳細說明書:
Sephadex G50 介質10mL規(guī)格使用方法:
一、交換反應 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應液.
3. 37℃反應 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質時,請在第 8 步之后進行。
Sephadex G50 介質10mL規(guī)格確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預雜交步驟 預雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點封閉,否則這些位點會吸附標記的探 針,造成高背景。
1. 將結合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預先封口,再剪掉一角, 留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
Sephadex G50 介質10mL規(guī)格步驟:
1. 如果標記的探針是雙鏈核酸,則需經變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機封口)。探針的加入量視探針標記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時間一般為 6-12 小時。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人信號傳導子及轉錄激活子2(STAT2)免疫試劑盒 human STAT2 ELISA Kit
NAD激酶(NADK)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanheatshockprotein27,HSP-27ELISA試劑盒人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanleukocytecommonantigen,LCA/CD45ELISAKit人白細胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠α2-巨球蛋白(α2M)ELISA試劑盒 ,英文名: α2M ELISA Kit
人血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒HumanFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T
大鼠激動異構酶/細胞分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒 Rat cytokinin MB,CKMB ELISA Kit
英文名稱RatCD40LELISAKit大鼠CD40L規(guī)格:96T/48T
可溶性真菌/酵母細胞膜蛋白(粗提)制備試劑盒20次
ELISAKitTetanusAb人破傷風抗體規(guī)格:48T/96T
小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat follistatin (FS) ELISA Kit 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒
humanthyroidstimulatingimmunoglobulin,TSIELISAKit 人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-nucleolusantibody,ANAELISA試劑盒人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物糖類總量鐵比色法定量檢測試劑盒20次
humanUDP-glucoseceramideglucosyltransferaseELISAKit人尿苷二磷酸葡萄糖神經酰胺葡萄糖基轉移酶(UGCG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-Arachidonoyl Glycerol-d5 (1 mg) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 2-AG-d5; 2-Arachidonoyl Glycerol-d5
Kuromanin (chloride) (1 mg) Chrysontemin|Cyanidin 3-O-β-glucopyranoside; 2-
mFluor Green 620-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml mFluor Green 620-streptavidin conjugate 1 mg/ml
4-metxyl Erlotinib (1 mg) N-(3-ethynyl-4-metxylpxenyl)-6,7-bis(2-metxoxyethoxy)-4-inoneazolinamine; 4-metxyl Erlotinib
Docosapentaenoic Acid (1 mg) 7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosapentaenoic acid; Docosapentaenoic Acid
D-( Ampicillin trihydrate
Gluten Exorphin A5Gly-Tyr-Tyr-Pro-Thr
α-ANF(1-28), humanSer-Leu-Arg-Arg-Ser-Ser-Cys-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Ser-Phe-Arg-Tyr(Disulfide bridge:Cys7-Cys23)
[Lys3, Phe10, Tyr13]-Autocamtide-2-Related Inhibitory Peptide (AIP) AnalogLys-Lys-Lys-Leu-Arg-Arg-Gln-Glu-Ala-Phe-Asp-Ala-Tyr
Biotin-Dynorphin A (1-17)Biotin-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Arg-Ile-Arg-Pro-Lys-Leu-Lys-Trp-Asp-Asn-Gln
Osteostatin (1-5) (human, bovine, dog, horse, mouse, rabbit, rat)Thr-Arg-Ser-Ala-Trp
Sephadex G50 介質10mL規(guī)格三錄乙酸Trichloroacetic acidAR500g
CA1221-10g腺嘌呤73-24-510g0
ER0281Eco24 I1500 units
土壤DNA提取試劑盒50T
激動素 (6-呋喃安基嘌呤)100mg
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