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更新時(shí)間:2017-07-17 12:39:39瀏覽次數(shù):1474次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL說(shuō)明書(shū)
Cy5-dCTP 溶液,10mM25μL保存步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過(guò)程中,一定不要使印跡。
Cy5-dCTP 溶液,10mM25μL保存使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無(wú)水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過(guò)第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
Cy5-dCTP 溶液,10mM25μL保存詳細(xì)說(shuō)明書(shū):
Cy5-dCTP 溶液,10mM25μL保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針?lè)肿拥奈稽c(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤(rùn)。
2. 將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒(méi)入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過(guò)程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠胰腺再生蛋白Iα(REG1α)ELISA試劑盒 ,英文名: REG1α ELISA Kit
Mouse endotoxin (ET) ELISA Kit 小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒
MouseTransformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAkit 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanD-Dimer,D2DELISAKit人D二聚體規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞AMPK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPPAR-α大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α規(guī)格:48T/96T
大鼠磷酸化cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白1(pCREB1)ELISA試劑盒 ,英文名: pCREB1 ELISA Kit
人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 96T/48T
其它ELISA試劑盒
CLIAKitforOT/BGP(MouseOsteocalcin/Boneglaprotein)ELISAKit小鼠骨鈣素/骨*蛋白規(guī)格:48T/96T
糖蛋白電泳高碘酸希爾(PAS)法阿爾新藍(lán)(ALCIANBLUE)染色試劑盒5次
ELISAKitIL-15人白介素15規(guī)格:48T/96T
小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat ovarian cancer marker-CA125 CA125 ELISA Kit 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 ELISA試劑盒
humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-Nogo-Aantibody,NOGO-AAbELISA試劑盒人NOGO-A抗體(Nogo-AAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanUltraSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit人超敏生長(zhǎng)激素(US-GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-Arachidonoyl Glycerol-d5 (100 ug) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 2-AG-d5; 2-Arachidonoyl Glycerol-d5
3,4,6-Tri-O-benzyl-β-D-Mannopyranose 1,2-(metxyl orthoacetate) (250 mg) 1,2-O-(1-metxoxyetxylidene)-3,4,6-tris-O-(pxenylmetxyl)-β-D-mannopyranose
mFluor Violet 540-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml mFluor Violet 540-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Resolvin D2 metxyl ester (25 ug) 7S,16R,17S-trixy7noxy-4Z,8E,10Z,12E,14E,19Z-docosahexaenoic acid metxyl ester; RvD2 metxyl ester|7(S),16(R),17(S)-Resolvin D2 metxyl ester; Resolvin D2 metxyl ester
Linoelaidic Acid (250 mg) 9E,12E-octadecadienoic acid; Linoelaidic Acid
2-nitno-5-thiobenzoic acid TNB
Glucagon-Like Peptide 1, (GLP-1) amide, humanHis-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH2
Z-Pro-D-LeuZ-Pro-D-Leu
[Lys1015,1024]-Thrombospondin-1 (1015-1024) (human, bovine, mouse)Lys-Arg-Phe-Tyr-Val-Val-Met-Trp-Lys-Lys
Biotin-Calcitonin (salmon I)Biotin-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 (Disulfide bridge:Cys1-Cys7)
Osteocalcin (7-19) (human)Gly-Ala-Pro-Val-Pro-Tyr-Pro-Asp-Pro-Leu-Glu-Pro-Arg
Cy5-dCTP 溶液,10mM25μL保存乙基本etxyl-benzenAR500mL
CA1241-5g腺苷58-61-75g0
ER0361Eco72 I2000 units
RNAlocker10ml
流*10g
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