當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標(biāo)記及檢測產(chǎn)品>> Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL說明書
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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL說明書步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL說明書使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL說明書詳細(xì)說明書:
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL說明書確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒 ,英文名: Glp-1 ELISA Kit
人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA檢測試劑盒Humanneuronalnuclearautoantibody,ANNA-2/RiELISAKit 96T/48T
大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)免疫試劑盒 Rat β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit
CLIAKitforT3(MouseTri-iodothyronine)ELISAKit小鼠三碘甲狀腺原氨酸規(guī)格:48T/96T
人體SNCG基因甲基化檢測試劑盒20次
ELISAKitanti-PIVIgM人抗副流感病毒IgM抗體規(guī)格:48T/96T
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP2 ELISA Kit
人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA檢測試劑盒HumanfibrinopeptideB,FPBELISAKit 96T/48T
大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)免疫試劑盒 Rat annexin I,ANX-I ELISA Kit
英文名稱RatreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit大鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)規(guī)格:96T/48T
酵母菌*補(bǔ)充混合(CSM)培養(yǎng)基100毫升
ELISAKitFK506人*規(guī)格:48T/96T
小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgMELISA Kit 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgMELISA試劑盒
humanthyroid-stimulatinghormonereceptorantibody,TSHRELISAKit 人促甲狀腺激素受體抗體(TSHR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-neutrophilantibody,ANAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)*試劑盒(包括抗體)10次
humanUltrasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-Arachidonoyl Glycerol-d8 (100 ug) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-5,6,8,9,11,12,14,15-d8 acid, 2-glyceryl ester; 2-AG-d8; 2-Arachidonoyl Glycerol-d8
CMP-Sialic Acid (wo7ium salt) (5 mg) CMP-Neu5Ac; N-acetyl-2-(xy7nogen 5’-cytidylate)-β-neuneminic acid, monowo7ium salt
trFluor Tb-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 trFluor Tb-streptavidin conjugate
Benocyclidine-d10 (5 mg) 1-(1-benzo[b]thien-2-ylcyclohexyl)-2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-d10-pipeni7ine; BCP-d10|Benzothiopxenylcyclohexylpipeni7ine-d10|BTCP-d10|GK 13-d1Benocyclidine-d10
Linoleoyl Ethanolamide (50 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-9Z,12Z-octadecadienamide; Linoleoyl Ethanolamide
1-[(4-chloropxenyl)metxyl]-2-(pyrrolidin Clemizole
Glucagon (19-29), bovine, human, porcineAla-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr
Z-Ala-Ala-Leu-pNAZ-Ala-Ala-Leu-pNA
[Lys0] g-1-MSH, amideLys-Tyr-Val-Met-Gly-His-Phe-Arg-Trp-Asp-Arg-Phe-NH2
Biotin-Atrial Natriuretic Peptide (1-28), human, porcinepiotin-Ser-Leu-Arg-Arg-Ser-Ser-Cys-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Ser-Phe-Arg-Tyr (Disulfide bridge Cys7-Cys23)
Osteocalcin (1-49) (human)Tyr-Leu-Tyr-Gln-Trp-Leu-Gly-Ala-Pro-Val-Pro-Tyr-Pro-Asp-Pro-Leu-Gla-Pro-Arg-Arg-Gla-Val-Cys-Gla-Leu-Asn-Pro-Asp-Cys-Asp-Glu-Leu-Ala-Asp-His-Ile-Gly-Phe-Gln-Glu-Ala-Tyr-Arg-Arg-Phe-Tyr-Gly-Pro-Val (Disulfide bridge: Cys23-Cys29)
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL說明書甲基叔丁基醚tert-Butyl metxyl etxenCP500ml
CA1271-500mg5''腺苷二磷酸二鈉鹽(ADP)16178-48-6500mg0
M0375-500GMaleic acid 馬來酸 (順丁稀二酸)110-16-7500g
Relax-ISO Blood DNA Kit I50ml(血量)
Isetxionic acid wo7ium salt100g
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