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*標(biāo)記 dUTP 溶液50μL保存

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*標(biāo)記 dUTP 溶液50μL保存一般使用 0.1×SSC做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

*標(biāo)記 dUTP 溶液50μL保存詳細(xì)說明書:

*標(biāo)記 dUTP 溶液50μL保存使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37
反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70加熱 510 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 7 M CH3COONH4pH 4.5)。如使用 CH3COONa 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL2.5 倍)的冷無水乙醇,-20放置 3060 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 58 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
*標(biāo)記 dUTP 溶液50μL保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 5-12,一般情況下可以在 55進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤(rùn)。
2. 將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 1-2 小時(shí),延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
*標(biāo)記 dUTP 溶液50μL保存步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠胰高血糖素樣肽1(GLP1)ELISA試劑盒 ,英文名: GLP1 ELISA Kit

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RatInhibinbindingprotein,INHBPELISA試劑盒大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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Humanintercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit人細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat phospholipase A2 (PL-A2) ELISA Kit 大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒

humandopamine,DAELISAKIT 人多巴胺(DA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAnti-myocardialantibody,AMAELISA試劑盒人抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10

HumanUltrasensitivityTri-iodothyronineu-T3ELISAKit人高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-Arachidonoyl Glycerol-d8 50 ug     5Z8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-5,68,911,1214,15-d8 acid, 2-glyceryl ester 2-AG-d8 2-Arachidonoyl Glycerol-d8

CMP-Sialic Acid wo7ium salt 25 mg     CMP-Neu5Ac; N-acetyl-2-xy7nogen 5-cytidylate-β-neuneminic acid, monowo7ium salt

trFluor Eu-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物     trFluor Eu-streptavidin conjugate

Benocyclidine-d10 25 mg     1-1-benzo[b]thien-2-ylcyclohexyl-2,2,3,3,4,4,5,56,6-d10-pipeni7ine; BCP-d10|Benzothiopxenylcyclohexylpipeni7ine-d10|BTCP-d10|GK 13-d1Benocyclidine-d10

Linoleoyl Ethanolamide 5 mg     N-2-xy7noxyetxyl-9Z,12Z-octadecadienamide Linoleoyl Ethanolamide

1-[4-chloropxenylmetxyl]-2-pyrrolidin     Clemizole
Glucagon (1-37), porcine; Oxyntomodulin, porcineHis-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Lys-Asn-Asn-Ile-Ala

Y-R-G-D-STyr-Arg-Gly-Asp-Ser

[Leu8,D-Trp22,Tyr25]-Somatostatin-28Ser-Ala-Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Leu-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Tyr-Thr-Ser-Cys (Disulfide bridge: Cys17-Cys28)

Biotin-Angiotensin I//II (1-7)Biotin-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro

Orphanin FQ, (Nociceptin)Phe-Gly-Gly-Phe-Thr-Gly-Ala-Arg-Lys-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Ala-Asn-Gln
*標(biāo)記 dUTP 溶液50μL保存二異丙胺DiisopropylamineCP250ml

CA1281-1g5''腺苷一磷酸二鈉鹽六水(AMP)4578-31-81G0

JN001-25GNicotinamide (VPP) 酰胺 (尼克酰胺)98-92-025g

血液DNA提取試劑盒(溶液型)10ml(血量)

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