脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)50 次保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是單獨(dú) 配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn): 1. 一站式，含有電泳所需要的所有試劑，即開即用，十分方便，免去了 實(shí)驗(yàn)人員稱取有毒物品。 2. 靈活，可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE，以便對長度各異 的 RNA 進(jìn)行電泳。 3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。 4. 使用新型緩沖液，可以防止甘油的干擾。
脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)50 次保存詳細(xì)介紹：

脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)50 次保存使用方法：
一、準(zhǔn)備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿（詳見該產(chǎn)品的使用手冊）。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍，得到 1X 電泳緩 沖液待用。
3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中，按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，搖晃致溶， 立即使用。注意：放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠
1. 估計所需要的凝膠溶液的體積，一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液，配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制：在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水，然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低，不會溶解在這少量溶液中）。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積，在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右，直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后，將三角瓶接上真空系統(tǒng)抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣（氧氣會降低聚合反應(yīng)效率）。但如果實(shí)驗(yàn)條件有限，此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意：即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis，TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化，TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠，然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后，在上下層分別加入適當(dāng)量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用，需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液，充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)50 次保存后續(xù)處理：
1. 染色觀察：將凝膠一面的玻璃板揭開，直接用仍然附著在另一玻璃板上的 凝膠進(jìn)行各種染色，包括銀染（固定、漂洗、顯影和定影等步驟）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天澤基因低毒核 酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后進(jìn)行膠回收處理。
3. Northern 雜交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后電轉(zhuǎn)移到帶正電的尼龍膜上，然后進(jìn)行雜交處理。
4. 放射自顯影：如果 miRNA 樣品電泳前經(jīng)過同位素標(biāo)記，則將凝膠一面的 玻璃板揭開，用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過來，然后包上保 鮮膜，真空抽干，然后使膠跟 X 光片向?qū)χ眠M(jìn)行放射自顯影。
CL-0435SF126(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HL-7702人正常肝細(xì)胞 HL-7702 human normal liver cell 1640+10% FBS

IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 cv-1(非洲綠猴腎細(xì)胞)
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84

人胎盤羊膜細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

SAC-II B2細(xì)胞，小鼠腹水瘤細(xì)胞 BRL 3A(大鼠肝細(xì)胞) 人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1

CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84

CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人胎盤羊膜細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

SAC-II B2細(xì)胞，小鼠腹水瘤細(xì)胞 BRL 3A(大鼠肝細(xì)胞) 人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1

CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Anti-V.cholera Ogawa/Biotin *化01群稻葉型霍亂弧菌抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3Multi-class antibodies規(guī)格： 1g

多配體蛋白聚糖1抗體 Anti-CD138/Syndecan-1 0.1ml

PI14 英文名稱： 蛋白酶抑制劑14抗體 0.2ml

EFS 英文名稱： 對接蛋白EFS抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) 磷酸化組蛋白去乙?；?/span>4/5/7抗體 規(guī)格 0.1ml

Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3Multi-class antibodies規(guī)格： 1g
Goat Anti-Mouse IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

Filaggrin 英文名稱： 兜甲蛋白抗體 0.1ml

白細(xì)胞粘附蛋白抗體 Anti-CD18/LFA-1 0.2ml

Anti-NR2C/NMDAR2C /FITC 熒光素標(biāo)記*受體2C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLSCR3 磷脂爬行酶3抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-CD167a(DDR1)/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記CD167a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)50 次保存UPAR 小鼠*受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-FasL 兔抗FasL抗體。Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

MYOG(Human myogenin) ELISA Kit 人肌細(xì)胞生成素 96T

SOCS7 英文名稱： 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子7抗體 0.1ml

phospho-CTBP1 (Ser422) 英文名稱： 磷酸化C端結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml

Anti-FasL 兔抗FasL抗體。Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml