當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>核酸電泳及回收>> DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)50 次*
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更新時間:2017-07-14 12:43:39瀏覽次數(shù):155次
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預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1)100g保存
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)50 次*后續(xù)處理:
1. 染色觀察:將凝膠一面的玻璃板揭開,直接用仍然附著在另一玻璃板上的 凝膠進(jìn)行各種染色,包括銀染(固定、漂洗、顯影和定影等步驟)、EB(每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液)、天澤基因低毒核 酸染料 DNAgreen(每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液)。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置,切膠后進(jìn)行膠回收處理。
3. Northern 雜交:按上法用 EB 等染料染色后,UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置,切膠后電轉(zhuǎn)移到帶正電的尼龍膜上,然后進(jìn)行雜交處理。
4. 放射自顯影:如果 miRNA 樣品電泳前經(jīng)過同位素標(biāo)記,則將凝膠一面的 玻璃板揭開,用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過來,然后包上保 鮮膜,真空抽干,然后使膠跟 X 光片向?qū)χ眠M(jìn)行放射自顯影。
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)50 次*詳細(xì)介紹:
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)50 次*產(chǎn)品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點: 1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了 實驗人員稱取有毒物品。 2. 靈活,可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對長度各異 的 RNA 進(jìn)行電泳。 3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。 4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)50 次*使用方法:
一、準(zhǔn)備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿(詳見該產(chǎn)品的使用手冊)。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。
3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠
1. 估計所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統(tǒng)抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會降低聚合反應(yīng)效率)。但如果實驗條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當(dāng)量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
CM-R023大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人羊膜上皮細(xì)胞HAmEpiC
恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4] 組織細(xì)胞淋巴瘤,U937細(xì)胞 A-673(橫紋肌瘤細(xì)胞)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022
L1CAM Others Human 人 CD171 / NCAML1 / L1CAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
FAP Others Human 人 FAP / Seprase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)cDNAHMSC-bm cDNA
HEPG2.2.15 肝癌細(xì)胞HBV病毒株
CL-0290MDA-MB-468(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞
雙位點HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)cDNAHMSC-bm cDNA
FAP Others Human 人 FAP / Seprase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HEPG2.2.15 肝癌細(xì)胞HBV病毒株
CL-0290MDA-MB-468(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞
雙位點HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Anti-TIEG1/KLF10/FITC 熒光素標(biāo)記TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AVPR2(arginine vasopressin receptor 2) *加壓素受體2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
抗干燥癥SSB/La抗體 Anti-SSB/La 0.2ml
SnoN 英文名稱: Smad核轉(zhuǎn)錄共抑制因子抗體 0.2ml
E2F2 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8抗體 規(guī)格 0.1ml
AVPR2(arginine vasopressin receptor 2) *加壓素受體2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗IgG 0.1ml
FUT1 英文名稱: 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體 Anti-CD79A/IGBP-1 0.2ml
Anti-OAT-1/FITC 熒光素標(biāo)記陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1(抗大、小鼠)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PLB/phospholamban 心臟磷蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-bovine IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) 200-1500 bp)50 次*MIP-4 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HPV16 E7 protein 人瘤病毒16型E7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NAIF1 protein 核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1 規(guī)格 0.2ml
LAC/LA(Human lupus anticoagulant) ELISA Kit 人狼瘡抗凝抗體 96T
SPAG6 英文名稱: 相關(guān)抗原6抗體 0.2ml
CSMD1 英文名稱: CSMD1抗體 0.2ml
Anti-HPV16 E7 protein 人瘤病毒16型E7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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