三合一 RNA 上樣液 ( 含 EB) 1.5mL運輸詳細(xì)介紹：

三合一 RNA 上樣液 ( 含 EB) 1.5mL運輸產(chǎn)品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點: 1. 一站式，含有電泳所需要的所有試劑，即開即用，十分方便，免去了 實驗人員稱取有毒物品。 2. 靈活，可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE，以便對長度各異 的 RNA 進(jìn)行電泳。 3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。 4. 使用新型緩沖液，可以防止甘油的干擾。
三合一 RNA 上樣液 ( 含 EB) 1.5mL運輸使用方法：
一、準(zhǔn)備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿（詳見該產(chǎn)品的使用手冊）。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍，得到 1X 電泳緩 沖液待用。
3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中，按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，搖晃致溶， 立即使用。注意：放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠
1. 估計所需要的凝膠溶液的體積，一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液，配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制：在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水，然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低，不會溶解在這少量溶液中）。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積，在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右，直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后，將三角瓶接上真空系統(tǒng)抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣（氧氣會降低聚合反應(yīng)效率）。但如果實驗條件有限，此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意：即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis，TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化，TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠，然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后，在上下層分別加入適當(dāng)量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用，需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液，充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
三合一 RNA 上樣液 ( 含 EB) 1.5mL運輸后續(xù)處理：
1. 染色觀察：將凝膠一面的玻璃板揭開，直接用仍然附著在另一玻璃板上的 凝膠進(jìn)行各種染色，包括銀染（固定、漂洗、顯影和定影等步驟）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天澤基因低毒核 酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后進(jìn)行膠回收處理。
3. Northern 雜交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后電轉(zhuǎn)移到帶正電的尼龍膜上，然后進(jìn)行雜交處理。
4. 放射自顯影：如果 miRNA 樣品電泳前經(jīng)過同位素標(biāo)記，則將凝膠一面的 玻璃板揭開，用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過來，然后包上保 鮮膜，真空抽干，然后使膠跟 X 光片向?qū)χ眠M(jìn)行放射自顯影。
CL-0309TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人神經(jīng)元總RNAHN tRNA

SHG44細(xì)胞，膠質(zhì)瘤細(xì)胞 人SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞,WI-38AV13細(xì)胞 膀胱成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5

FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人黑色素瘤細(xì)胞;A875

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

LLC細(xì)胞，小鼠肺癌細(xì)胞 CHO(中國倉鼠卵巢細(xì)胞) 恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1

PPBP Protein Rat 重組大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人黑色素瘤細(xì)胞;A875

IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

LLC細(xì)胞，小鼠肺癌細(xì)胞 CHO(中國倉鼠卵巢細(xì)胞) 恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1

PPBP Protein Rat 重組大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Anti-RAR- Beta /FITC 熒光素標(biāo)記維甲酸受體-β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Beta-Amyloid 1-42 CT β淀粉樣肽 1-42 (C端多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg

腸上皮干細(xì)胞蛋白抗體 Anti-Lgr5/GPR49 0.1ml

phospho-Smad2 (Ser465) 英文名稱： 磷酸化Smad2抗體 0.1ml

Fetuin A 英文名稱： 胎球蛋白A 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PLC gamma 1(Ser1248) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 規(guī)格 0.1ml

Beta-Amyloid 1-42 CT β淀粉樣肽 1-42 (C端多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg
Rabbit Anti-horse IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

Factor H 英文名稱： 補體因子H抗體 0.1ml

毒蕈堿型乙酰*受體M2抗體 Anti-ChRM2 0.1ml

Anti-Osx /FITC 熒光素標(biāo)記成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PKA regulatory subunit I beta 蛋白激酶受體相關(guān)1β抗體 規(guī)格 0.2ml

Rabbit Anti-MUME IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗長爪沙鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
三合一 RNA 上樣液 ( 含 EB) 1.5mL運輸PTN(Human pleiotrophin) ELISA Kit 人多效生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-GAD65 *脫羧酶-65抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格 0.1ml

Alpha1 Beta-GP(Human Alpha1 Beta glycoprotein) ELISA Kit 人α1β糖蛋白 96T

sp-selectin 英文名稱： 可溶性P選擇素抗體 0.1ml

CELSR2 英文名稱： 表皮生長因子樣蛋白2抗體 0.1ml

Anti-GAD65 *脫羧酶-65抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml