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更新時間:2017-07-10 09:14:26瀏覽次數(shù):127次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)植物膜蛋白/葉綠體蛋白提取試劑盒100T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物膜蛋白/葉綠體蛋白提取試劑盒100T免費代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物膜蛋白/葉綠體蛋白提取試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
TE-11(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人臍血間質(zhì)干細(xì)胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells
ACVR1C Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
U266細(xì)胞,人骨髓瘤細(xì)胞 串珠鐮刀菌 人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2
人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]
HO-8910(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC
EPOR & CD131 Others Human 人 EPOR & CD131 Homodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HIT-T15 敘利亞倉鼠胰島β細(xì)胞
CM-R035大鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
THP-1人單核白血病細(xì)胞
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1002 人神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
PDE1C Others Human 人 PDE1C 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人前列腺癌細(xì)胞;PC-3 [PC3]
人海馬神經(jīng)元
RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞 R1000細(xì)胞 WISH(羊膜細(xì)胞)
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo
CA4 Others Mouse 小鼠 Car4 / CA4 / CAIV 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A6 ELISA Kit
人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測試劑盒HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T
大鼠和肽素(copeptin)免疫試劑盒 Rat Copeptin ELISA kit
英文名稱Rat15-lipoxygenaseELISAKit大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鄰氨基卞啶同(AMAC)熒光輔助糖蛋白電泳(FACE)檢測試劑盒5次
vaspin人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑規(guī)格:48T/96T
兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 人血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒
HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit 人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanfibrinopeptideB,FPBELISA試劑盒人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性生物發(fā)光法定量檢測試劑盒20次
Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物膜蛋白/葉綠體蛋白提取試劑盒100T免費代測人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人5羥色胺轉(zhuǎn)運受體蛋白ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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