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更新時間:2017-07-07 11:42:53瀏覽次數(shù):271次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
細胞質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe C02 500T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
細胞質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe C02 500T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
MKN-28(人胃癌高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2
人小腦顆粒細胞RNAHCGC miRNA5 μg
ALCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照)
MCF-7/ER36細胞,人癌細胞 小鼠胰島素瘤β細胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠,SV40巨T抗原),NIT-1細胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞
CL-0400NCI-H358(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪細胞培養(yǎng)基PAM
CL-0136L6(大鼠成肌細胞)5×106cells/瓶×2
GPT Others Rat 大鼠 GPT1 / GPT 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人氣管平滑肌細胞裂解物HTSMCL
HPAC細胞,人胰腺癌細胞 人支氣管上皮細胞,16HBE細胞 皮膚肥大細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTF
TGFBR2 Others Human 人 TGFβR2 / TGFR2 人細胞裂解液 (陽性對照)
ALDH3A1 Others Human 人 ALDH3A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人晶狀體上皮細胞裂解物HLEpiCL
小鼠黑色素瘤細胞;B16
HEp-2細胞,喉表皮樣癌細胞 人食管鱗癌,KYSE70細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP3)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP3 ELISA Kit
人細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA檢測試劑盒HumanSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIgELISAKit 96T/48T
大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)免疫試劑盒 Rat annexin IV,ANX-IV ELISA Kit
英文名稱RatreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit大鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)規(guī)格:96T/48T
酵母菌落直接PCR檢測試劑盒20次
ELISAKitHBF人胎兒血紅蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human pepsinogen A (PG-A) ELISA Kit 人*原A(PG-A)ELISA試劑盒
HumanUltraSensitiveProstateSpecificAntigen,PSAUSELISAKit 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISA試劑盒人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CDK5/P35激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinZELISAKit人蛋白Z(ProteinZ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe C02 500T使用說明書人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗胸腺細胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗信號識別顆??贵w(SRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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