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更新時間:2017-07-07 11:39:34瀏覽次數(shù):119次
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酸性蛋白染色試劑盒100ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
酸性蛋白染色試劑盒100ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
酸性蛋白染色試劑盒100ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
HEL(人紅白細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
人結(jié)膜成纖維細胞RNAHConF miRNA5 μg
LIF Others Human 人 LIF 人細胞裂解液 (陽性對照)
SK-RC-42細胞,人腎癌細胞 鼠肝癌細胞系,MM45T.Li細胞 人間充質(zhì)干細胞-臍帶
小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)
hMSC-UC-c 從臍帶基質(zhì)提取的的人類間質(zhì)干細胞(hMSC-UC) 500,000cells 大鼠小膠質(zhì)細胞RM
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3
GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
表皮黑色素細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人星形膠質(zhì)細胞 人肺癌細胞,NCI-H1869[H1869]細胞 YAC-1(淋巴瘤細胞)
人上皮細胞;Ca Ski
CPA1 Others Mouse 小鼠 CPA1 / CPA / Carboxypeptidase A1 人細胞裂解液 (陽性對照)
TNFSF13 Others Mouse 小鼠 TNFSF13 人細胞裂解液 (陽性對照)
人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT-15 [HCT15]
人小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
P388細胞,小鼠白血病細胞 空腸彎曲桿菌 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1
CCL20 Protein Mouse 重組小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標簽)
P815(小鼠肥大細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1B & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細胞色素c氧化酶亞基VIB多肽1(廣泛存在)(COX6B1)免疫試劑盒 Human cytochrome c oxidase subunit Vib polypeptide 1(ubiquitous)(COX6B1)ELISA kit
ADP含量測試盒 高效液相色譜法 50管/48樣
RatNuclearfactor-kappaB,NF-κBELISA試劑盒大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanH-rasELISA試劑盒人H-rasELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human CpG oligodeoxynucleotide (CpG-ODN) ELISA Kit 人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA試劑盒
HumanReninELISAKit 人腎素(Renin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanComplementfragment3brccptor,C3bRELISA試劑盒人補體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CaMKIV激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
humanproviralintegrationsite1,Pim1ELISAKit人前病毒整合位點1(Pim1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酸性蛋白染色試劑盒100ml免費代測人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性細胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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