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堿性蛋白染色試劑盒100ml使用說明書

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更新時間:2017-07-07 11:39:20瀏覽次數(shù):143次

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堿性蛋白染色試劑盒100ml使用說明書注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
堿性蛋白染色試劑盒100ml使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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HCCLM3(人高轉移肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人間充質干細胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg

ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM-2 / CD102 人細胞裂解液 (陽性對照)

FC33細胞,Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞 小鼠垂體細胞,MPC細胞 人臍動脈內皮細胞

小鼠成纖維細胞(EGFP標記)

hCD133+-CB-c pooled 從臍帶血提取的人類CD133+祖細胞(hCD134+-CB),混合來源 100000 大鼠腹脊髓神經(jīng)元RN-vsc
CM-M032小鼠腸靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基100mL

GYPA Others Human GYPA / CD235a / Glycophorin A 人細胞裂解液 (陽性對照)

扁桃體上皮細胞培養(yǎng)基TEpiCM

NCI-H1563[H1563]細胞,人胚肺細胞 人胚腎細胞,2V6.11細胞 人少突膠質前體細胞-懸浮生長HOPC-os

小型豬腎細胞;MPK

PDGFRA Others Human PDGFRa / CD140a 人細胞裂解液 (陽性對照)
人成纖維母細胞-胎兒(HDF-f)( 5×105 )

人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]

RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元

T淋巴瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77 大鼠腎成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

P815 小鼠肥大細胞癌細胞

CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人細胞色素P450(CYP450)免疫試劑盒 Human Cytochrome P450 ELISA kit

ATP含量測試盒 高效液相色譜法 50/48

RatN-terminalprocollagenpropeptide,PNPELISA試劑盒大鼠Ⅲ型前膠原肽(PNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanhormonesensitivelipase,HSLELISA試劑盒人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/HLAELISAKit人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHC/HLA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 人維生素K1(VK1)ELISA試劑盒

HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanComplementfragment3a,C3aELISA試劑盒人補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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HumanP-Selectin/CD62P/GMP140ELISAKitP選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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