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PA飽和水溶液(1.22%)100ml使用說明書

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更新時間:2017-07-07 11:34:17瀏覽次數(shù):197次

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PA飽和水溶液(1.22%)100ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
PA飽和水溶液(1.22%)100ml使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
PA飽和水溶液(1.22%)100ml使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
BC-022(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1

LIF Others Human LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H205細(xì)胞,人腎上腺腺瘤細(xì)胞 牛腎細(xì)胞,MDBK (NBL-1)細(xì)胞 CL-0357HHCC(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系

HCH-c 人軟骨細(xì)胞 500,000cells 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a
人支氣管成纖維細(xì)胞HBF

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Texas/05/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞

CM-H107人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系

人癌細(xì)胞;MCF7 人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人角膜上皮細(xì)胞RNAHCEpiC miRNA5 μg

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3

SW116細(xì)胞,人大腸癌細(xì)胞 人葡萄膜黑色素細(xì)胞,UM細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2

Hep 3B(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

AGRP Others Human AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 ,英文名: GP-II ELISA Kit

人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA檢測試劑盒HumanCyclin-D3ELISAKit 96T/48T

駱駝天*氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)免疫試劑盒 Camel Aspartate Aminotransferase,AST ELISA kit

CLIAKitforP-Selectin(HumanP-Selectin/CD62P/GMP140)ELISAkitP選擇素規(guī)格:48T/96T

石蠟切片總游離*菲律賓(FILIPIN)熒光直接染色試劑盒50

ELISAKitu-T4人高敏甲狀腺素規(guī)格:48T/96T
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 大鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒

HumanSomatostatin,SSELISAKit 人*(SS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humancollectinsub-familymember11,COLEC11ELISA試劑盒人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanReceptorfortheFcregionofimmunoglobulinA,FcαRELISAKit*AFc段受體Ⅰ(FcαR/CD89)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PA飽和水溶液(1.22%)100ml使用說明書人癌抗原(CA125ELISA試劑盒         組裝/原裝

人癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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