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結(jié)晶紫-檸檬酸染色液(0.1%)100ml使用說明書

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更新時(shí)間:2017-07-07 11:32:40瀏覽次數(shù):176次

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結(jié)晶紫-檸檬酸染色液(0.1%)100ml使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
結(jié)晶紫-檸檬酸染色液(0.1%)100ml使用說明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
BC-009(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920

ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

293FT細(xì)胞,表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞 大鼠肝細(xì)胞瘤,H4-II-E-C3細(xì)胞 CL-0324BT-20(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml

HTEpC-c 人類氣管上皮細(xì)胞(HTEpC) 500,000cells 人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC
甲狀腺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml

HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901]

倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;HL-1 骨髓瘤細(xì)胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細(xì)胞 3T3/Fas/com細(xì)胞,轉(zhuǎn)基因細(xì)胞

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]

ACPL2 Others Human ACPL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(RM)(5×105)

人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1

KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422 小鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

細(xì)胞名稱 種屬

VWC2 Others Human VWC2 / Brorin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人纖調(diào)蛋白(FMOD)免疫試劑盒 Human FMOD ELISA Kit

尿酸含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50/24

RatNeurotrophin3,NT-3ELISA試劑盒大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanhighmobilitygroupprotein17,HMG-17ELISA試劑盒人高速泳動(dòng)蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanmacrophagechemotaticfactor,MCFELISAKit人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒

HumanDihydrotestosterone,DHISAKit 人雙輕睪酮(DHT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCollagenaseIELISA試劑盒人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織5-羥色胺-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(SerotoninN-Acetyltransferase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

HumanReceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
結(jié)晶紫-檸檬酸染色液(0.1%)100ml使用說明書*A(IgA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

*AFc段受體Ⅰ(FcαR/CD89)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素(irGH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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