結(jié)晶紫水溶液(1%)100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
結(jié)晶紫水溶液(1%)100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
結(jié)晶紫水溶液(1%)100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
A875(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人細(xì)胞;Hela

TEK Others Cynomolgus 食蟹猴 Tie2 / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HEK-293細(xì)胞，Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞 恒河猴胚腎細(xì)胞,FRhK-4細(xì)胞 CL-0251MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

II型肺泡上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HBEpC-c 人支氣管上皮細(xì)胞(HBEpC) 500,000cells 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1

HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

TE-1人食管癌細(xì)胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / interleukin 3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人毛發(fā)干細(xì)胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞 Mouse
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/3/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶

人晶狀體上皮細(xì)胞RNAHLEpiC miRNA5 μg

兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1 腦神經(jīng)瘤細(xì)胞，Neuro-2A細(xì)胞 SH3細(xì)胞，小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞

人胚肺二倍體細(xì)胞;HL

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人纖連蛋白(FN)免疫試劑盒 Human Fibronectin,FN ELISA Kit

植物原花青素測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣

RatneuropeptideY,NP-YELISA試劑盒大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanHighdensitylipoprotein,HDLELISA試劑盒人高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanLysozyme，LZMELISAKit人*(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠L苯丙酸解酶(PAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat dehydroepiandrosterone S7 (DHEA-S7) ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒

Humanestrogen,EELISAKit 人雌激素(E)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCollagenTypeⅢ,ColⅢELISA試劑盒人Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanreceptortyrosinekinase,RTKsELISAKit人受體*激酶(RTKs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
結(jié)晶紫水溶液(1%)100ml實(shí)驗(yàn)方法*M(IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

*j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

*G4（IgG4）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

*G(IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝