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更新時間:2017-07-07 11:31:50瀏覽次數(shù):119次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
龍膽紫水溶液(0.5%)100ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
龍膽紫水溶液(0.5%)100ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
龍膽紫水溶液(0.5%)100ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
A-498(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×2
人成骨肉瘤細胞;Saos-2
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 人細胞裂解液 (陽性對照)
AD293細胞,人胚腎細胞 牛胚氣管細胞,EBTr(NBL-4)細胞 CL-0303PATU8988(人胰腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
膀胱上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HNEpC-c 人鼻粘膜上皮細胞(HNEpC) 500,000cells 支氣管成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
魚源細胞
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
U-373MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 U-373MG-EGFP (Ubc-EGFP lentiviral construct stable strain) of human brain glioma cells DMEM+10% FBS
IL2 Protein Mouse 重組小鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白
人成纖維母細胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 ) MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞 Mouse
PARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人間充質(zhì)干細胞-骨髓總RNAHMSC-bm tRNA
家貓肺細胞;FCA-L1
HCCC-9810細胞,膽管細胞型肝癌細胞 *系,HL細胞 小鼠肝癌細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32
RTN4R Others Mouse 小鼠 Nogo Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人纖連蛋白(FN)自身抗體免疫試劑盒 Human fibronectin(FN)antoantibody ELISA kit
植物總酚測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatNeuron-specificenolase,NSEELISA試劑盒大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHighdensitylipoproteincholesterol,HDL-CELISA試劑盒人高密度脂蛋白*(HDL-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlymphotoxinβ,LTBELISAKit人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat dehydroepiandrosterone (DHEA) ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒
HumanProgesterone,PROGELISAkit 人孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCollagenTypeⅡ,ColⅡELISA試劑盒人Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量檢測試劑盒20次
HumanReceptorⅠfortheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅠELISAKit*GFc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
龍膽紫水溶液(0.5%)100ml免費代測*重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
*重鏈(IgH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
*樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
*輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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