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更新時間:2017-07-07 11:30:30瀏覽次數(shù):142次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
番紅O染色液(0.1%)100ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
番紅O染色液(0.1%)100ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
番紅O染色液(0.1%)100ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
ZR-75-30(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
人多發(fā)性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]
LILRB2 Others Human 人 LILRB2 / ILT4 / LIR-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
293T/17細胞,SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞(亞系) 鼠小腦細胞,C8-D1A細胞 CL-0259BC-020(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
肺大動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HBSMC-c 人類支氣管平滑肌細胞(HBSMC) 500,000cells 嬰兒真皮成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CM-H027人淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
*(含100mL 酶解緩沖液) 10mL
FaDu人咽鱗癌細胞 FaDu human pharyngeal squamous cell carcinoma MEM(GIBCO)+10%FBS
IL7 Protein Human 重組人 IL7 / interleukin 7 蛋白
人人(HEK-a) ( 5×105 ) 小鼠成纖維細胞(EGFP標(biāo)記) Mouse
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照)
人間充質(zhì)干細胞(脂肪)cDNAHMSC-ad cDNA
大鼠肝細胞;BRL 3A
HPAC細胞,人胰腺腺泡上皮癌 人舌癌細胞,T6細胞 雜交瘤(B類);C3110D2E11
JEG-3(人絨毛膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-25010 Hepatocyte Growth Medium, 肝細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
小鼠N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)ELISA試劑盒 ,英文名: NAT1 ELISA Kit
人纖溶酶原(Plg)ELISA檢測試劑盒HumanPlasminogen,PlgELISAKit 96T/48T
大鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)免疫試劑盒 Rat Caspase-8,Casp-8 ELISA Kit
CLIAKitfor大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199規(guī)格:48T/96T
磷酸二酯酶4B(Phosphodiesterase4B)0.25單位
ELISAKitMIS/AMH人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素規(guī)格:48T/96T
小鼠N-乙?;?/span>-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸(AcSDKP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat glycogen phosphorylase isoenzyme MM (GP-MM) ELISA Kit 大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒
HumanTestoterone,ISAKit 人睪酮(T)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancoagulationfactorⅫ,FⅫELISA試劑盒人*Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組化染色操作20樣本
HumanRelaxin,RLNELISAKit人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
番紅O染色液(0.1%)100ml使用說明書人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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