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詹納斯綠B染色液(0.5%)10ml使用說明書

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更新時(shí)間:2017-07-07 11:27:27瀏覽次數(shù):285次

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詹納斯綠B染色液(0.5%)10ml使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
詹納斯綠B染色液(0.5%)10ml使用說明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
7PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
WISH(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo

CNTN5 Others Mouse 小鼠 Contactin 5 / CNTN5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

NCI-295R細(xì)胞,人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞TCM15,S180細(xì)胞 CL-0226SW626(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

HMC-c 人冠狀動脈平滑肌細(xì)胞(HMC) 500,000cells 小腸隱窩上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/barnswallow/HongKong/D10-1161/2010) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205

豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1 狗腎細(xì)胞,MDCK細(xì)胞 NG108-15細(xì)胞,小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞之融合細(xì)胞

人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]

HYOU1 Others Human HYOU1 / HSP12A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-sp

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)

801-D細(xì)胞,人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控,含EGFP基因的CHO細(xì)胞,CHO-AA8細(xì)胞 CM-M026小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Sf-21(昆蟲細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 12556-023 TM-C100 Supplem ent,liquid 75ml
大鼠膜聯(lián)蛋白A5(Annexin A5)ELISA試劑盒 ,英文名: Annexin A5 ELISA Kit

人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA檢測試劑盒Humanplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 96T/48T

羊白介素7(IL7)免疫試劑盒 Sheep Interleukin-7,IL7 ELISA kit

CLIAKitforPAIg(Humanplaet-associatedimmunoglobulins)ELISAKit人血小板相關(guān)免疫球蛋白規(guī)格:48T/96T

水蛭素(hirudin)活性比色法定量檢測試劑盒20

ELISAKitUBC人膀胱癌抗原規(guī)格:48T/96T
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat glucocorticoid receptor (GR) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒

Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancoagulationfactorrelatedantigen,F-AgELISA試劑盒人*Ⅷ相關(guān)抗原(-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶8(HDAC8)活性比色法定量檢測試劑盒20

humanRESTcorepressor3,RCOR3ELISAKitREST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
詹納斯綠B染色液(0.5%)10ml使用說明書人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人尿游離*(UFC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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