乳酸酚棉藍(lán)染色液50ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
乳酸酚棉藍(lán)染色液50ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
乳酸酚棉藍(lán)染色液50ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
TSCCa(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A6

PDGFRB Others Cynomolgus 食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

95-C細(xì)胞，人低轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 大鼠腎小管上皮細(xì)胞，NRK細(xì)胞 CL-0154MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HCF-c 人類的心臟成纖維細(xì)胞(HCF) 500,000cells 神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HCC-9204 肝癌

293 [HEK-293]人胚腎細(xì)胞 293 human embryonic kidney cell line [HEK-293] DMEM+10% FBS

TNF Protein Rat 重組大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HVVEC)( 5×105 ) SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞 Human
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人滑膜細(xì)胞RNAHS miRNA5 μg

牛胚氣管細(xì)胞;EBTr (NBL-4)

A172細(xì)胞，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 肝細(xì)胞癌,HepG2細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205

小鼠肉瘤瘤株;S180

CDH12 Others Human 人 CDH12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肌球蛋白重鏈1(MYH1)ELISA試劑盒 ，英文名： MYH1 ELISA Kit

人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)ELISA檢測試劑盒Humanfibronectionrelatedantigen,FRAELISAKit 96T/48T

大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3)免疫試劑盒 Rat intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit

英文名稱Ratcardiotrophln-lELISAKit大鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)規(guī)格：96T/48T

海石竹*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

ELISAKitPAF人血小板活化因子規(guī)格：48T/96T
小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒

HumanChorionicGonadotrophinβ,β-HCGELISAKit 人絨毛膜*β(β-HCG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanclaudin14,CLDN14ELISA試劑盒人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙?；?/span>1(HDAC1)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanRibonuclease,RNASEELISAKit人核糖核酸酶(RNASE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
乳酸酚棉藍(lán)染色液50ml實(shí)驗(yàn)方法人前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝