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魯哥氏染色液(Lugol's碘液,1%)100ml免費(fèi)代測(cè)

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更新時(shí)間:2017-07-06 10:04:09瀏覽次數(shù):137次

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魯哥氏染色液(Lugol's碘液,1%)100ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
魯哥氏染色液(Lugol's碘液,1%)100ml免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755

CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

LTEP-s細(xì)胞,人肺鱗癌細(xì)胞 小鼠皮膚細(xì)胞,JB6-C30細(xì)胞 CL-0114Hs 578T(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

前列腺平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

HBdMEC-c 人膀胱微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HBdMEC) 500,000cells 皮下脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人扁桃體上皮細(xì)胞HTEpiC

HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

雪羊皮膚細(xì)胞;SSHS1

倉(cāng)鼠源細(xì)胞 管癌細(xì)胞,T-47D細(xì)胞 B6YH4細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞支原體陽(yáng)性

QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞 Human

SFTPD Others Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD / COLEC7 / Collectin-7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
LILRA5 Others Rat 大鼠 LILRA5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人虹膜色素上皮細(xì)胞RNAHIPEpiC miRNA5 μg

人心室肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

PC-12細(xì)胞,大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化) 22RV1(前列腺癌細(xì)胞) 人肝癌細(xì)胞;SMMC-7721

PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白

STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL18RAP / IL1R7 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠白介素8受體β(IL8Rβ)ELISA試劑盒 ,英文名: IL8Rβ ELISA Kit

人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISAKit 96T/48T

大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)免疫試劑盒 Rat Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA Kit

英文名稱(chēng)RatEstriolELISAKit大鼠雌三醇(Estriol)規(guī)格:96T/48T

細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50

ELISAKitSDH人*脫氫酶規(guī)格:48T/96T
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒

Humanplacentalprotein,PPELISAKit 人胎盤(pán)蛋白(PP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancicatricialPemphigoid,CPELISA試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

*(leucine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20

humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKitS100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人全段甲狀旁腺激素(I-PTH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人去乙?;福?/span>HDACELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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