血腦屏障完整性檢查試劑盒100ml使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
血腦屏障完整性檢查試劑盒100ml使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
血腦屏障完整性檢查試劑盒100ml使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株;L615

JTB Others Human 人 Jumping Translocation Breakpoint / JTB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

SK-LU-1細(xì)胞，人低分化肺腺癌細(xì)胞 大鼠腎成纖微細(xì)胞,NRK-49F細(xì)胞 CL-0106HFL1(人肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HBMEC-c 人類腦部微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HBMEC) 500,000cells 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
CL-0272EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HA Others H6N4 甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠腮腺細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HUVEC[HUV-EC-C]人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 Human umbilical vein endothelial cells HUVEC[HUV-EC-C] DMEM+10%FBS

IL18BP Protein Mouse 重組小鼠 IL18BP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PA-1(人卵巢腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 H9c2(2-1)(大鼠心肌細(xì)胞)
EDA2R Others Rat 大鼠 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人虹膜色素上皮細(xì)胞HIPEpiC

大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞 The CCRF-CEM [CCRF CEM] human acute lymphoblastic leukemia T lymphocytes 1640+10%Hyclone 滅活血清

EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞)) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml
大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人線粒體呼吸鏈復(fù)合物I 免疫試劑盒 Human mitochondrial respiratory chain complex I ELISA kit

葡萄糖氧化酶(GOD)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣

Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISA試劑盒大鼠受體(M-AChR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanHepatitisDvirusIgM,HDVIgMELISA試劑盒人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

humanlungcancerMarkerELISAKit人肺癌標(biāo)志物ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠αN已?；咸擒彰?/span>(αNAG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒

Humanplacentalactogen,HPLELISAKit 人胎盤催乳素(HPL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanChromogranin,CgAELISA試劑盒人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

總脂肪酶(lipase)定量檢測(cè)試劑盒50次

Humansalivaryductautoantibody,SDAELISAKit人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
血腦屏障完整性檢查試劑盒100ml使用說明書人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人醛縮酶(ALD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝