固綠染色液(0.5%)100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
固綠染色液(0.5%)100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
固綠染色液(0.5%)100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
T-24(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP

EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HPAEpiC細(xì)胞，人肺泡上皮細(xì)胞 小鼠腎小球系膜細(xì)胞,MES-13細(xì)胞 CL-0090Hacat(人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

HPMEC-c 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HPMEC) 500,000cells 腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
上皮細(xì)胞培養(yǎng)基MEpiCM-prf

HA Others H7N2 甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0910

大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE 慢性髓原白血病細(xì)胞，K-562細(xì)胞 P3X63Ag8.653細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 Human

CRTAM Others Human 人 CRTAM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105)

人紅系白血病細(xì)胞;TF-1

CM-R024大鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1 小鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 Mouse

SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人腺病毒3(ADV3)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human ADV3 IgG ELISA Kit

丙二醛(MDA)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

RatMotilin,MTLELISA試劑盒大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgMELISA試劑盒人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanL-SelectinELISAKit人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒

HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanChorionicGonadotrophinβ,β-CGELISA試劑盒人絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10次

HumanSalusinαELISAKit人Salusin-αELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
固綠染色液(0.5%)100ml實(shí)驗(yàn)方法人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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