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TTC染色液(2%)50ml使用說明書

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TTC染色液(2%)50ml使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
TTC染色液(2%)50ml使用說明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
SW620(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1

TPM4 Others Human TPM4 / Tropomyosin 4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

Z-HL16C細(xì)胞,人胚肺成纖維細(xì)胞突變癌細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-6細(xì)胞 CL-0074DLD-1(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)

HPAEC-c 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAEC) 500,000cells 顱蓋造骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0309TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人神經(jīng)元總RNAHN tRNA

SHG44細(xì)胞,膠質(zhì)瘤細(xì)胞 SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞,WI-38AV13細(xì)胞 膀胱成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5

FLT4 Others Human VEGFR3 / FLT4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人黑色素瘤細(xì)胞;A875

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

LLC細(xì)胞,小鼠肺癌細(xì)胞 CHO(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞) 恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1

PPBP Protein Rat 重組大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 ,英文名: VWF ELISA Kit

人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAdenovirusIgG,ADV-IgGELISAKit 96T/48T

大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒 Rat GATA binding protein 4,GATA4 ELISA Kit

CLIAKitforsLRELISAKit大鼠可溶性瘦素受體規(guī)格:48T/96T

軟瓊脂細(xì)胞克隆試劑盒10/20

ELISAKitALP人堿性磷酸酶規(guī)格:48T/96T
小鼠α*S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 大鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒

HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit 人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancholinephosphoglyceride,PC/CPGELISA試劑盒人*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

總膽汁酸(TBA)定量檢測(cè)試劑盒20

HumanscavengerreceptorB,SRBELISAKit人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TTC染色液(2%)50ml使用說明書人乳鐵蛋白(LFELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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