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更新時間:2017-07-06 09:59:03瀏覽次數(shù):114次
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TTC染色液(1%)50ml售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
TTC染色液(1%)50ml售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)
GLC-82-TK細胞,人肺腺癌細胞(轉染TK基因的GLC-82細胞) 非洲綠猴腎細胞,COS-1細胞 CL-0066COLO 205(人結腸癌細胞)5×106cells/瓶×2
腎小管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HSaVEC-c 人隱靜脈內(nèi)皮細胞(HSaVEC) 500,000cells 淋巴成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人腸平滑肌細胞HISMC
HA Others H7N8 甲型流感 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
豬腎細胞;PK(15)
大鼠肺細胞;WTRL1 胃腺癌細胞,SGC-7901細胞 GR細胞,鼠成纖維細胞系
Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞 Mouse
PCSK1 Others Human 人 PCSK1 / NEC1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠中腦縫神經(jīng)細胞(腦脊)(MN-r)(1×106)
人海馬趾星形膠質(zhì)細胞RNAHA-h miRNA5 μg
兔腎細胞;RK13
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1 小鼠成骨細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs) Rattus
EFNA3 Others Mouse 小鼠 EFNA3 / Ephrin-A3 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腺病毒IgG(ADV-IgG)免疫試劑盒 Human Adenovirus IgG,ADV-IgG ELISA Kit
脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
RatMothersagainstdecapentaplegichomolog1,Smad1ELISA試劑盒大鼠Smad1ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AgELISA試劑盒人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit人L苯*解氨酶(PAL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vitamin E (VE) ELISA Kit 人維生素E(VE)ELISA試劑盒
Humanplacetallactogen,PLELISAKit 人胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancholineacetylase,CHAcELISA試劑盒人*乙?;?/span>(CHAc)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
總RNA樣品mRNA選擇純化試劑盒10次
humanschistosomaELISAKit人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TTC染色液(1%)50ml售后服務人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人狀瘤病毒抗體(HPV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人瘤病毒58(HPV-58)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人瘤病毒18(HPV-18)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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