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更新時(shí)間:2017-07-06 09:56:38瀏覽次數(shù):164次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實(shí)驗(yàn)方法
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結(jié)晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)100ml售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
結(jié)晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)100ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
結(jié)晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)100ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
SMMC-7721(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK
EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
WI-38細(xì)胞, 人胚肺細(xì)胞 小鼠肺成纖維細(xì)胞,L929細(xì)胞 CL-00025637(人膀胱癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
雪旺氏細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HDMEC-c 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)來(lái)自少年者 500,000cells 肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/3/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人晶狀體上皮細(xì)胞RNAHLEpiC miRNA5 μg
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1 腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,Neuro-2A細(xì)胞 SH3細(xì)胞,小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞
人胚肺二倍體細(xì)胞;HL
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人骨肉瘤細(xì)胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
CM-H106人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MGC803-GFP細(xì)胞,綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞 人成骨肉瘤細(xì)胞,Saos-2細(xì)胞 293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP
Eca-109(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
C2 Others Human 人 C2 / Complement Component 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)免疫試劑盒 Human adenylyl cyclase 1,AC-1 ELISA Kit
L-半乳糖苷-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISA試劑盒大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanhepatitisBvirussurfaceantigen,HBsAgELISA試劑盒人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlowdensitylipoprotein,LDLELISAKit人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat retinol binding protein 4 (RBP-4) ELISA Kit 大鼠*結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒
HumanC-opeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit 人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanChlamydiapneumoniaeantibody,Cpn-AbELISA試劑盒人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米T14品系基因檢測(cè)試劑盒20次
Humanselenoprotein1,SEP1ELISAKit人硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
結(jié)晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)100ml售后服務(wù)人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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