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更新時間:2017-07-06 09:56:38瀏覽次數(shù):169次
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結晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)100ml售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
結晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)100ml售后服務操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
結晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)100ml售后服務實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
SMMC-7721(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
正常大鼠腎細胞;NRK
EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細胞裂解液 (陽性對照)
WI-38細胞, 人胚肺細胞 小鼠肺成纖維細胞,L929細胞 CL-00025637(人膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2
雪旺氏細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HDMEC-c 人真皮微血管內(nèi)皮細胞(HDMEC)來自少年者 500,000cells 肺微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人間充質(zhì)干細胞-臍帶
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/3/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人晶狀體上皮細胞RNAHLEpiC miRNA5 μg
兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1 腦神經(jīng)瘤細胞,Neuro-2A細胞 SH3細胞,小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞
人胚肺二倍體細胞;HL
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
CM-H106人內(nèi)臟脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
MGC803-GFP細胞,綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞 人成骨肉瘤細胞,Saos-2細胞 293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP
Eca-109(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2
C2 Others Human 人 C2 / Complement Component 2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)免疫試劑盒 Human adenylyl cyclase 1,AC-1 ELISA Kit
L-半乳糖苷-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISA試劑盒大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanhepatitisBvirussurfaceantigen,HBsAgELISA試劑盒人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlowdensitylipoprotein,LDLELISAKit人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat retinol binding protein 4 (RBP-4) ELISA Kit 大鼠*結合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒
HumanC-opeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit 人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanChlamydiapneumoniaeantibody,Cpn-AbELISA試劑盒人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉基因玉米T14品系基因檢測試劑盒20次
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結晶紫MES溶液(0.1%,pH6.0)100ml售后服務人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)細胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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