當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞染色>> 醋酸洋紅染色液50ml實驗方法
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更新時間:2017-07-06 09:51:54瀏覽次數(shù):372次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
醋酸洋紅染色液50ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
醋酸洋紅染色液50ml實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
醋酸洋紅染色液50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
SCaBER(人膀胱鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
犬腎細(xì)胞系/IgR;MDCK/IgR
TNFSF13B Others Cynomolgus 食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
95-D細(xì)胞,人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)血小板基因倉鼠卵巢細(xì)胞,CHO-pt細(xì)胞 CM-M018小鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞-HDMEC
Gibco 17001-074 TM-C100 Basal Medium,liquid 450ml
WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2
豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5 大鼠肝細(xì)胞,BRL 3A細(xì)胞 NBLE細(xì)胞,新生牛眼晶體上皮細(xì)胞
人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1
HA Others H12N5 甲型流感 H12N5 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人細(xì)胞;Hela P10s-11F
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元
ZR-75-1細(xì)胞,導(dǎo)管癌細(xì)胞 人絨癌細(xì)胞耐藥株,JEG-3/VP16細(xì)胞 人氣管平滑肌細(xì)胞RNAHTSMC miRNA5 μg
恒河猴腎細(xì)胞;MMK3
EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)免疫試劑盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit
*還原酶(GR)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmatrixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHeparanase,HPAELISA試劑盒人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit人脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human P-selectin (omentin) ELISA Kit 人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒
HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISAKit 人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCathepsinK,cath-KELISA試劑盒人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)RF3品系基因檢測試劑盒20次
Humansignalrecognizationparticleantibody,SRPELISAKit人抗信號識別顆??贵w(SRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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