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更新時間:2017-07-06 09:47:15瀏覽次數(shù):149次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
Masson-Fontana黑色素染色試劑盒3×50ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Masson-Fontana黑色素染色試劑盒3×50ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Masson-Fontana黑色素染色試劑盒3×50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
恒河猴腎細胞;LLC-MK2
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
NCI-H838細胞,人非小細胞肺癌細胞 大鼠正常肝細胞,BRL-3A細胞 CM-R055大鼠卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
人角膜細胞HK
Promocell C-28055 M1-Macrophage GenerationMedium DXF, M1-巨噬細胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml
人星形膠質(zhì)細胞裂解物HAL
HBEGF Others Human 人 HBEGF / DTR 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人結(jié)直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]
HCC 94[HCC941122]細胞,子宮鱗癌細胞(高分化) 人低分化胃癌細胞,SGC7901細胞 豬腎細胞;PK(15)
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1
DKK3 Others Mouse 小鼠 Dkk-3 / DKK3 人細胞裂解液 (陽性對照)
TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肝星形細胞RNAHHSteC miRNA5 μg
PA319 人大腸癌細胞
CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記)
人淋巴細胞;1301 人腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠抵抗素(RETN)ELISA試劑盒 ,英文名: RETN ELISA Kit
人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA檢測試劑盒HumancardiacisoformofTropninT,cELISAKit 96T/48T
大鼠*抗*Ⅲ復(fù)合物(TAT-III)免疫試劑盒 Rat thrombin-antithrombin III complex,TAT-III ELISA Kit
英文名稱RatThyroid-PeroxidaseELISAKit大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酵母*過氧化物酶(GSHPX)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitCP/CER人銅藍蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠白介素16(IL-16)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat epithelial neutrophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒
Humandeoxypyridinoline,DPDELISAKit 人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancartilageoligomericprotein,COMPELISA試劑盒人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因棉花MON1445品系基因檢測試劑盒20次
HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Masson-Fontana黑色素染色試劑盒3×50ml實驗方法人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人脫氫表雄酯(DHEA-S)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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