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細(xì)胞普魯士藍(lán)染色試劑盒2×20ml使用說(shuō)明書

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更新時(shí)間:2017-07-06 09:46:11瀏覽次數(shù):564次

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細(xì)胞普魯士藍(lán)染色試劑盒2×20ml使用說(shuō)明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
細(xì)胞普魯士藍(lán)染色試劑盒2×20ml使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
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RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

NCI-H157細(xì)胞,人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 小鼠門肉瘤細(xì)胞,S-180細(xì)胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞HAMEC

Promocell C-28051 Monocyte Attachment Medium, 單核細(xì)胞附著培養(yǎng)基(即用型) 250ml
平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf

HDAC3 Others Human HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

轉(zhuǎn)化細(xì)胞

P3X63Ag8細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞 人十二指腸腺癌細(xì)胞,HuTu-80細(xì)胞 CM-H029人臍帶單核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)

FCGR4 Others Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGR4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠心肌細(xì)胞(RCM)(1×106)

人肝細(xì)胞RNAHH miRNA5 μg

荷蘭黑白花奶牛牛肺細(xì)胞;DCL1

T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞 Human

EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A7 ELISA Kit

人心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancardiotrophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T

大鼠核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit

英文名稱Rat17-HydroxycorticosteroidsELISAKIT大鼠17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)規(guī)格:96T/48T

裂解液VIII:細(xì)菌活性化蛋白制備溶液20

ELISAKitvisfatin人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素規(guī)格:48T/96T
小鼠白介素18(IL-18)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Three rat triiodothyronine (T3) ELISA Kit 大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒

HumanOsteopontin,OPNELISAKit 人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCartilageglycoprotein39,HCgp-39ELISA試劑盒人軟骨糖蛋白39(HCgp-39)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因大豆GTS40.3.2品系基因檢測(cè)試劑盒20

HumanSolubleAdenylateCyclase,sACELISAKit人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞普魯士藍(lán)染色試劑盒2×20ml使用說(shuō)明書人維生素A(VA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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