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更新時間:2017-07-06 09:42:48瀏覽次數(shù):116次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
細(xì)胞膜染色試劑盒(綠色熒光)BBcellProbe M01 5000T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細(xì)胞膜染色試劑盒(綠色熒光)BBcellProbe M01 5000T免費代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)胞膜染色試劑盒(綠色熒光)BBcellProbe M01 5000T免費代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
P19(小鼠畸胎瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人張氏肝細(xì)胞;Chang liver
EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SUME-a細(xì)胞,人鼻咽癌細(xì)胞系 大鼠肝癌細(xì)胞,RH-35細(xì)胞 CM-H087人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基MenCM
Promocell C-27417 Preadipocyte Growth Medium KIT, 前脂肪細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B2
HGF Others Mouse 小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
原代心肌細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml
HUVEC(原代)細(xì)胞,人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 HPVl6 E6、E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細(xì)胞,TC-1細(xì)胞 人雪旺細(xì)胞總RNAHSC tRNA
QGY-7703(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Eca-109(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0246YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠肺細(xì)胞;V79
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF-mt)(5×105)
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHHSEC cDNA
大鼠肝細(xì)胞;IAR20
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2 小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 Mouse
TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠*肽(Glp-1)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人鋅轉(zhuǎn)運蛋白6(ZnT6)免疫試劑盒 Human zinc transporter 6,ZnT6 ELISA Kit
蘋果酸酶(ME)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISA試劑盒大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHeatShockProtein90,HSP-90ELISA試劑盒人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeukotrieneB4,LT-B4ELISAKit人白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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HumanCarbohydrateantigen19-9,CA19-9ELISA試劑盒人糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒10次
HumansolubleFactor-relatedApoptosisligand,sFASL/Apo-1ELISAKit人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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