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網(wǎng)狀纖維染色試劑盒(改良Gordon-Sweets法)300ml免費(fèi)代測(cè)

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更新時(shí)間:2017-07-06 09:40:19瀏覽次數(shù):125次

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網(wǎng)狀纖維染色試劑盒(改良Gordon-Sweets法)300ml免費(fèi)代測(cè)公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶(hù)選購(gòu)!

網(wǎng)狀纖維染色試劑盒(改良Gordon-Sweets)300ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線(xiàn)粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線(xiàn)粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
網(wǎng)狀纖維染色試劑盒(改良Gordon-Sweets)300ml免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CNE1-lmpl細(xì)胞,轉(zhuǎn)基因鼻咽癌細(xì)胞系 小鼠黑色素瘤細(xì)胞,B16F1細(xì)胞 CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OM-prf

Promocell C-26130 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 腎上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基2型套裝 500ml
小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)

ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM-2 / CD102 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg

FC33細(xì)胞,Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞 小鼠垂體細(xì)胞,MPC細(xì)胞 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

hCD133+-CB-c pooled 從臍帶血提取的人類(lèi)CD133+祖細(xì)胞(hCD134+-CB),混合來(lái)源 100000 大鼠腹脊髓神經(jīng)元RN-vsc
人表皮角質(zhì)細(xì)胞-(HEK-a) ( 5×105 )

人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)

人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z 大鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

IL2RA Others Mouse 小鼠 IL2RA / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠乙酰*(Ach)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子4(STAT4)免疫試劑盒 human STAT4 ELISA Kit

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測(cè)試盒 紫外分光光度法 50/48

Ratmacrophageinflammatoryprotein3α,MIP-3αELISA試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanHeatShockFactor1,HSF1ELISA試劑盒人熱休克因子1(HSF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanleukocyteantigenE,HLA-EELISAKit人類(lèi)白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素7(IL-7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human melatonin (MT) ELISA Kit 人褪黑素(MT)ELISA試劑盒

Humanurokinase,UKELISAKit 人*(UK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCalfintestinalalkalinephosphatase,CIAPELISA試劑盒人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

干細(xì)胞熒光定性檢測(cè)試劑盒20

Humansolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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