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更新時間:2017-07-06 09:39:31瀏覽次數(shù):149次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH化學氧化法)300ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH化學氧化法)300ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH化學氧化法)300ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401
REG4 Others Human 人 REG4 / RELP / GISP 人細胞裂解液 (陽性對照)
HNE2細胞,人鼻咽癌細胞 小鼠淋巴瘤細胞,Yac-1細胞 CM-H014人氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
肝細胞培養(yǎng)基HM-prf
Promocell C-26011 Renal Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 腎上皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml
CM-H017人上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
ICOS Others Rat 大鼠 ICOS / AILIM / CD278 人細胞裂解液 (陽性對照)
主動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
NB4細胞,人急性早幼粒白血病細胞 綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞,MFC-GFP細胞 成纖維細胞培養(yǎng)基FM-sf-prf
MS751(人子宮頸表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2
BEL-7402(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R123大鼠角膜成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL 人細胞;Hela
GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺細胞;HLF-a
恒河猴腎細胞;MMK3
Ls-174-T細胞,人結腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,SK23細胞 人細胞;Hela
HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×2
APP Others Human 人 APP / Protease nexin-II 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠乙酰*轉移酶(CHAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人信號識別顆粒抗體(SRP)免疫試劑盒 Human signal recognization particle antibody,SRP ELISA Kit
檸檬酸合酶(CS)測試盒 可見分光光度法 10管/9樣
Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanguanylatenucleotidebindingprotein4,Gbp4ELISA試劑盒人鳥苷酸結合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat heat shock protein 60 (Hsp-60) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒
HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISA試劑盒人降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
中量真菌/酵母細胞基因組DNA純化試劑盒10次
HumanSolubleprotein-100,S-100ELISAKit人S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH化學氧化法)300ml實驗方法人*α1(Thymosinα1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*(Thymosin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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