Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH自然氧化法)300ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH自然氧化法)300ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH自然氧化法)300ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-H292(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYM

CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HNE1細(xì)胞，人鼻咽癌細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,FO細(xì)胞 CM-H006人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-prf

Promocell C-26001 Renal Epithelial Cell GrowthMedium , 腎上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml
CL-0424RK1(大鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

ICOSLG Others Human 人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人內(nèi)根殼細(xì)胞RNAHHIRSC miRNA5 μg

QBC939細(xì)胞，人膽管癌細(xì)胞 褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞,RIN-m細(xì)胞 NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系

MA-891(小鼠癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

NHEK adult pooled Pellet 正常人類表皮角質(zhì)細(xì)胞團(tuán)塊(捐獻(xiàn)者，混合來(lái)源) > 1 mio.cells 雪旺細(xì)胞培養(yǎng)基SCM
CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPMEC miRNA5 μg

豬腎傳代細(xì)胞;IBRS-2

LS180細(xì)胞，人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞,MuM-2B細(xì)胞 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]

HGC-27(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒 ，英文名： ODF ELISA Kit

人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humansignaltransduction-Smad1ELISAKit 96T/48T

魚(yú)免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒 Fish immunoglobulin A,IgA ELISA kit

CLIAKitforpERKELISAKit大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶規(guī)格：48T/96T

食物污染ATP生物發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次

ELISAKitPACAP人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽規(guī)格：48T/96T
小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human hyaluronic acid binding protein (HABP) ELISA Kit 人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒

Humanphospho-extracellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit 人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancalcineurin,CaNELISA試劑盒人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

質(zhì)譜分析20樣本

HumanSolubleprotein-100B，S-100BELISAKit人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Mallory磷鎢酸蘇木素染色試劑盒(PTAH自然氧化法)300ml免費(fèi)代測(cè)人雄烯二(ASD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝